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脂蛋白相关磷脂酶A2研究概况 　　磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）是一类具有催化甘油磷酸脂二位（sn-2）酰基水解活性的酶类家族。通过催化细胞内膜磷脂水解，产生以花生四烯酸（arachidonic acid，AA）为主的游离脂肪酸和溶血磷脂，AA等继而产生如前列腺素及血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）等具有强烈生物活性的代谢产物。PLA2作为这类脂质介质的限速酶，其生理功能包括参与磷脂的更新、胞膜的再构、磷脂过氧化物的解毒、促进机体坏死组织清除、促进肺泡表面活性物质代谢、宿主防御和细胞信号传递等。同时，PLA2广泛参与人体炎症反应、炎症相关性疾病等多种病理反应。由于PLA2活性产物的多样性，使PLA2在多种疾病的发生发展中扮演了关键角色。因此，PLA2也成为了疾病治疗中药物干预的靶点[1]。 　　1 Lp-PLA2概述 　　PLA2家族大致可分为依赖钙离子的分泌型细胞外sPLA2（secretory PLA2，sPLA2）、胞浆型cPLA2（cytosolic PLA2，cPLA2）及非钙离子依赖型iPLA2（Ca2+-independent PLA2，iPLA2）[2]。脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2）或PLA2G7，是由441个氨基酸组成的蛋白质，分子量为45kDa，以活性形式存在于血液循环中。Lp-PLA2不需要Ca2+维持其催化活性，属于iPLA类。Lp-PLA2主要作用于氧化磷脂（oxidized phospholipids，OxPL），水解其甘油磷脂二位（Sn-2）酰基键产生氧化型游离脂肪酸（oxidized free fatty acids，Ox-FFA）和溶血磷脂酰胆碱（lyso-phosphatidyrlcholine，Lyso-PC），后二者是促炎介质，能刺激粘附分子和细胞因子的产生。与磷脂酶A2家族其余成员不同的是，Lp-PLA2具有降解PAF的活性，因此也被称为血小板活化因子乙酰水解酶（platelet-activating factor acetylhydrolase，PAF-AH）。 　　1.1 Lp-PLA2的来源 生化研究表明，血浆中Lp-PLA2的主要来源是巨噬细胞，当单核细胞向成熟的巨噬细胞转变时，它们会诱导Lp-PLA2mRNA的表达，并分泌大量具有Lp-PLA2活性的物质。利用Northern blot研究发现，在含有大量巨噬细胞的组织（如胸腺，扁桃腺，胎盘）中，单核细胞向巨噬细胞的分化会诱导产生高水平的Lp-PLA2mRNA。Asano等人研究发现，在野生型Lp-PLA2或Lp-PLA2基因缺陷的纯合子骨髓移植患者中，其血浆Lp-PLA2来源于供体的造血干细胞。也有其他研究报导，在人类主动脉[3]，哺乳动物乳腺[4]，不成熟的胚胎滋养层巨细胞[5]，以及血小板中发现了少量Lp-PLA2的表达。 　　1.2 Lp-PLA2表达的调控 Lp-PLA2的表达受到多种外在因素的影响，例如：作用底物，各类细胞因子，甾体类激素等。与此同时，细胞分化的状态也会明显地对其表达产生影响。早期研究发现，抗炎类糖皮质激素地塞米松能使分化的HL-60细胞分泌Lp-PLA2增多，而促炎症因子IFN-γ，IL-1α，IL-1β，IL-4，IL-6，TNF-α，GM-CSF和M-CSF使巨噬细胞分泌Lp-PLA2减少。但也有研究得出了相反的结论：人们发现在分化较差的单核细胞，如RAW264.7和THP-1细胞中，炎症因子LPS，IL-1β，G-CSF和TNF-α的刺激能明显增加活性Lp-PLA2的合成和分泌[6-7]。因此，促炎因子或抗炎因子对Lp-PLA2表达的调控似乎取决于细胞的分化状态。在活体的研究中发现，雌激素能降低成年雄性和雌性大鼠血浆Lp-PLA2水平，而孕激素有相反的作用。并且发现，不论是雄性或雌性，幼年或成年大鼠，地塞米松都能使其血浆Lp-PLA2水平升高。 　　1.3 Lp-PLA2的生物学活性 Lp-PLA2能水解的底物范围广泛，包括在机体调控下的生物合成途径中或氧化应激水平升高后产生的各类物质，包括PAF，PAF类似的OxPL，氧化修饰的磷脂酰胆碱，酯化的异前列烷等，但对PAF有明显的特异性。反应产物包括溶血血小板活化因子（lyso-PAF），Lyso-PC和不同类型的脂肪酸，例如醋酸盐，游离异前列烷，氧化脂肪酸以及过氧化氢脂肪酸（hydroperoxy fatty acids）。 　　Lp-PLA2能被磷酸硝基苯基二乙酯和3，4-二氯异香豆素抑制，对乙二胺四乙酸（EDTA），Ca2+和巯基试剂不敏感，表明该酶是一个丝氨酸依赖