脾虚证患者唾液淀粉酶活性异常机制研究概况.docVIP

脾虚证患者唾液淀粉酶活性异常机制研究概况 　　【摘要】 通过分析影响唾液淀粉酶活性的因素，探讨脾虚证患者唾液淀粉酶活性异常的机制，对脾虚证临床参考指标引入唾液淀粉酶活性比值的研究作出综合性评价并进行深入的思考与展望。 　　【关键词】 脾虚证； 唾液淀粉酶； 活性； 异常； 机制 　　doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.1.088 文献标识码 A 文章编号 1674-6805（2017）01-0159-04 　　中医在论述脾的生理功能时，认为“脾开窍于口”，“脾在液为涎”和“脾主涎”等，涎即为唾液，脾开窍于口是指饮食味觉感受与脾胃运化功能密切相关。唾液在脾胃调和时的分泌是适量的，在受到如食物的刺激时会分泌增多，而在一般情况下具有保护口腔环境的作用。“多流涎” 在论述脾的病理时是作为重要的证候之一。另外，在临床辩证、治疗等方面，均发现脾与唾液有着密切的关系。因此，在生理上脾与唾液之间有密切的关系。唾液淀粉酶（sAA）是人类唾液蛋白中最为丰富的蛋白[1]，占到唾液蛋白的40%～50%[2]，常被用来考察唾液蛋白分泌的主要指标。因此，很多学者利用sAA的活性变化对“脾主涎”及脾虚证的本质进行了探索。 　　广州中医药大学脾胃研究所在20世纪80年代就率先开始对脾虚证患者sAA活性进行了探索性研究，发现脾虚证患者在柠檬酸刺激前后的sAA活性比值（酸刺激后sAA活性/酸刺激前sAA活性）较正常人显著下降[3]，这一结果随后被国内多位学者所证实[4-8]。然而，进一步的研究发现sAA活性比值作为脾虚证临床参考指标可操作性和重现性及精准程度不够高[9-11]，推广应用不理想[5、7]。 　　鉴于脾虚证sAA活性的研究及sAA活性比值的临床应用中存在的问题，本文试对脾虚证患者的sAA活性改变的机制多年来的研究概况进行了综合，分析，并探讨如下。 　　1 影响唾液淀粉酶（sAA）活性的因素 　　sAA主要由糖基化和非糖基化两种形式的同工酶家族组成，口腔总sAA活性除了受口腔内酶反应环境影响外，主要取决于酶的含量和sAA同工酶的种类和比例。酶的含量与酶的合成及分泌密切相关，而sAA同工酶的种类和比例主要通过酶蛋白翻译后糖基化修饰形成，因此，有必要从sAA基因水平、翻译后修饰及分泌过程深入分析影响sAA活性改变的机制。 　　sAA活性主要受AMY1基因拷贝数变异、sAA含量、N-糖基化sAA含量及β-AR介导的分泌调控所影响，其中，编码sAA的AMY1基因拷贝数变异直接影响sAA的含量，sAA含量和sAA的N-糖基化程度直接影响sAA的活性，而且sAA的分泌则主要由β-AR介导调控，另外β-AR还会影响sAA的N-糖基化进而影响其活性。当然sAA活性也受其他因素的影响，包括应激水平，吸烟、运动、药物和饮食习惯等[12-15]，但AMY1基因拷贝数变异、sAA含量和N-糖基化sAA含量及β-AR介导的分泌调控是引起sAA活性变化的“内因”，而应激、吸烟、运动、药物和饮食等则是“外因”，“外因”必须通过“内因”起作用。 　　1.1 AMY1基因拷贝数变异与sAA活性 　　AMY1基因位于染色体lp21上，编码sAA[16]。AMY1基因是人类基因组中拷贝数变异最大的基因之一[17-18]，其变异范围达到2～15倍之多。研究显示，AMY1基因的拷贝数与sAA含量和活性正相关[19-20]，一般来说，AMY1基因拷贝数越多，sAA含量和活性也越大。但是，如果AMY1基因拷贝数是决定sAA含量和活性的唯一因素，并不能解释同一个人在其不同年龄阶段sAA活性存在差异甚至是巨大差异的事实，因为对同一个人来讲AMY1基因拷贝数是不变的，因此，有学者研究指出AMY1基因的拷贝数并不是决定sAA含量的唯一因素[16]。然而不可否认的是，AMY1基因拷贝数变异是影响人群中sAA含量和活性存在个体差异的重要遗传学基础。 　　1.2 sAA含量和N-糖基化sAA含量与sAA活性 　　sAA是一种含钙金属酶，特异性水解α-1，4糖苷键，能够将淀粉水解成葡萄糖和麦芽糖[21]。作为唾液蛋白中重要的外分泌蛋白，sAA主要由糖基化和非糖基化?芍中问降耐?工酶家族组成，非糖基化sAA分子量为57kD，糖基化sAA分子量为62kD。口腔sAA活性主要除了受AMY1基因拷贝数变异影响外，还取决于sAA的含量和sAA同工酶的种类和比例，而sAA同工酶种类和比例主要通过酶蛋白翻译后的糖基化修饰而形成。sAA主要以N-聚糖的形式进行糖基化，正常人唾液中sAA有25%～30%是糖基化的sAA。研究显示，α-淀粉酶的糖基化修饰会影响该酶的折叠、分泌、活性及稳定性[22-23]，并且在动物模型上证实老年大鼠相对年轻大鼠其腮腺细胞蛋白N-糖基化显著降低[24