艾灸“足三里”镇痛与脊髓p2x3受体及p物质表达的相关性研究-针灸推拿学专业论文.docxVIP

成都中医药大学硕士学位论文 成都中医药大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 中文摘要 目的：本实验通过研究艾灸足三里后，脊髓水平 P2X3 受体及 SP 的表达变化 ，验证艾灸是否通过对穴位刺激，进而影响穴位神经支配的相应脊髓节段的神经 感受器中受体的变化，来研究艾灸镇痛作用机制,为艾灸在防治类风湿关节炎等 炎症疼痛的临床运用方面提供科学实验依据。 方法：选 30 只 SD 大鼠，雄性清洁级，将其随机分为模型组、模灸组及空白 组 3 组，每组 10 只；其中模型组和模灸组以 CFA 于大鼠右侧足底造模。分别于 造模前及造模 3 天后测得各组大鼠的痛阈及右侧足容积，实验第三天开始，对模 灸组进行灸法治疗，穴选右侧足三里，每日一次，每次 15 分钟，治疗 6 天后， 再次测得各组大鼠的痛阈及足容积。心脏灌注固定取出脊髓节段（L4-L6）后， 用免疫荧光组织化学双标法检测脊髓背角中 P2X3 受体及 SP 的表达情况。 结果：1、右侧足容积结果：（1）组内比较：模型组与模灸组的足容积分别 在造模后与造模前相比增大（P0.01）；模型组在治疗后与造模前相比增大， （P0.01）;模灸组治疗后与造模后相比减小（P0.05），且治疗后与造模前相比 增大（P0.01）。（2）组间比较：造模后分别与空白组比较，模型组与模灸组的 足容积均增大（P0.01）；治疗后，分别与空白组相比，模型组和模灸组足容积 均增大（P0.01），与模型组相比，模灸组足容积减小（P0.05）。 以上结果表明造模成功，模灸组治疗有效；治疗后模灸组足趾肿胀程度小于 模型组，但与空白组相比，大鼠足趾仍见明显肿胀。 2、痛阈结果：（1）组内比较：模型组内，分别与造模前相比，造模后与治 疗后痛阈均降低（P0.05）。模灸组内，分别与造模后相比，造模前与治疗后均 升高（P0.05）。（2）组间比较：造模后，分别与空白组相比，模型组与模灸组 痛阈均降低（P0.05）。治疗后，与空白组相比，模型组及模灸组痛阈仍降低 （P0.05）；而与模型组相比,模灸组痛阈明显升高（P0.01）。以上结果表明疼 痛模型造模成功，且模灸组治疗后大鼠痛阈明显提高，即治疗有效。 3、免疫荧光组织化学双标法结果： P2X3 受体在脊髓背角的表达，与空白组相比，模型组与模灸组的平均荧光 密度值均提高（P0.05）；但与模型组相比，模灸组的平均荧光密度值明显降低 （P0.05）,其结果提示大鼠造模后脊髓背角 P2X3 受体表达明显增多，艾灸治疗 后可抑制其表达。 SP 在脊髓背角的表达，与空白组比较，模型组的平均荧光密度值提高 （P0.01）；与模型组相比，模灸组的平均荧光密度值下降（P0.05）,以上结果 提示造模后可促进 SP 的表达增多，艾灸治疗后可抑制其表达。 合成图像示，在脊髓背角中，P2X3 受体与 SP 的共表达在空白组较少，在模 型组数目最多，模灸组数目次之。 结论:1、艾灸在类风湿关节炎等炎症疼痛过程中有明显的镇痛作用。 2、AA 大鼠的脊髓水平 P2X3 受体及 SP 变化参与疼痛的发展过程,在艾灸治 疗后，两者的表达都明显被抑制；考虑艾灸可能通过干预 P2X3 受体及 SP 的表达 发挥镇痛作用。 3、在艾灸治疗炎症疼痛过程中，P2X3 受体可能通过降低 SP 调节的兴奋性 突触传递，参与外周到脊髓的信息传递。 关键词：艾灸；镇痛；P2X3 受体；P 物质 Abstract Objective: This experiment studies the change of the expression of P2X3 receptor and substance P after moxibustion at Zusanli, verify whether through stimulating “Zusanli” with moxibustion, thereby affecting changes of the receptors in nerve receptors innervated points corresponding spinal segment, to study the mechanism of moxibustion analgesia. The experiment could provide put forward scientific experimental basis for clinical application of moxibustion prevention and treatment of rheumatoid arthritis and other inflammatory pain. Methods: 30 clean male SD rat