藏药柳茶水提物对胃癌耐药细胞BGC8235―FU增殖及药物敏感性影响.docVIP

藏药柳茶水提物对胃癌耐药细胞BGC8235―FU增殖及药物敏感性影响 　　[摘要]研究藏药柳茶水提物（Liu Tea extracts，LTE）对人胃癌氟尿嘧啶耐药细胞株BGC823/5-FU的增殖和药物敏感性的影响。将LTE作用于人胃癌耐药细胞BGC823/5-FU，采用MTT检测其对细胞增殖、化疗药物敏感性的影响以及与5-氟尿嘧啶（5-FU）的联用效应，应用CompuSyn软件计算联合用药指数（combination index，CI）；流式细胞术（FCM）检测LTE对BGC823/5-FU细胞凋亡的作用；Western blot检测不同质量浓度（100，200，400 mg?L-1）LTE对5-FU作用下胃癌耐药细胞中P-gp，Bcl-2，Bax及Caspase-3（17KD）蛋白表达的影响。结果显示，LTE能够有效的抑制胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU的生长，抑制率与药物浓度及作用时间呈正相关；LTE能够促进细胞发生凋亡，800 mg?L-1的LTE作用细胞24 h后凋亡率可高达46.2%（P50，P0.05），一定程度上逆转耐药细胞对化疗药物的耐药性，逆转倍数分别为2.35，1.68，1.96，0.52。蛋白检测结果显示，随着柳茶水提物浓度的增加，耐药细胞内Bcl-2表达逐渐下降，Bax和Caspase-3蛋白表达显著升高，差异具有统计学意义（P0.01）。但耐药蛋白P-gp的表达在实验组和对照组细胞中无显著变化。LTE能有效抑制胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU的生长，并在一定程度上逆转其化疗耐药。抑制抗凋亡蛋白的表达、激活促凋亡蛋白、诱导耐药细胞发生凋亡可能是其作用的主要机制。 　　[关键词]藏药柳茶；胃癌；多药耐药；BGC823/5-FU细胞；细胞凋亡 　　[Abstract]To investigate the effects of Liu Tea extracts（LTE） on proliferation， apoptosis and drug sensitivity of drug-resistant gastric cancer cell BGC823/5-FU. MTT assay was used to analyze effect of LTE on cell growth and sensitivity chemotherapeutic drugs， and synergistic effect of the combination of LTE with 5-FU on BGC823/5-FU cells. Combination index （CI） was calculated by CompuSyn. Cell apoptosis was measured by flow cytometry （FCM）. Protein expressions of P-gp， Bcl-2， Bax and Caspase-3 （17KD） were detected by Western blot at different concentrations of LTE in BGC823/5-FU cells （100， 200， 400 mg?L-1）. The results showed that LTE had an inhibitory effect on growth of BGC823/5-FU cell in a dose-time-dependent manner and significantly reduced IC50of 5-FU， CDDP， PTX and ADM to BGC823/5-FU cells（P-1LTE after 24 h（P 　　[Key words]traditional Tibetan drug Liu Tea； gastric cancer； multidrug resistance； BGC823/5-FU cell line； apoptosis 　　藏药柳茶，藏文名称尼阿措（音译），是蔷薇科鲜卑花属，窄叶鲜卑花植物Sibraea angustata。柳茶为青藏高原所特有，主要生长在甘肃东南部、四川西部、青海南部、云南西北部等海拔2 800 m以上的高山地区，且分布广泛、资源丰富[1]。作为藏族民间常用药物，柳茶的叶和嫩枝经煎煮常作为茶饮，主要用于治疗胃部不适，具有清除胃热、消食导滞和清除油腻的功效[2]。现有研究表明[3]柳茶具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、调节机体脂代谢、抗肝损伤及提高免疫力等多种药理学作用。有文献报道柳茶水提物的主要有效成分包括三萜类化合物、多糖、挥发油以及多种有机酸和有机酸酯类化合物[4]。其中，三萜类化