藏药经典验方玛奴西汤颗粒免疫调节作用实验研究.docVIP

藏药经典验方玛奴西汤颗粒免疫调节作用实验研究 　　[摘要]　目的　研究藏药“玛奴西汤”颗粒的免疫调节作用。　方法　采用炭粒廓清法和2，4-二硝基氟苯（DNFB）所致的迟发性超敏反应法观察“玛奴西汤”颗粒对小鼠的免疫调节作用。　结果　在炭粒廓清实验中，玛奴高、中、低剂量组的吞噬指数显著提高，与模型组比较，差异有统计学意义（P　＜　0.05或P　＜　0.01）；在迟发性超敏实验中，玛奴中、低剂量组的左右耳重量差显著增加，且高于模型组，差异有统计学意义（P　＜　0.05）。　结论　藏药“玛奴西汤”颗粒具有增强机体免疫功能的作用。 　　[关键词]　藏药；玛奴西汤颗粒；增强机体免疫功能 　　[中图分类号]　R29 [文献标识码]　A [文章编号]　1673-7210（2012）12（b）-0050-02 　　“玛奴西汤”（缩写为MNXT）系藏药经典验方，载于藏医名著《四部医典》，至今已有一千多年的临床应用史，由藏木香、悬钩木、宽筋藤和干姜4味药材组成，具有解表、发汗之功效。用于治疗瘟病初期、流感初期、恶寒头痛、关节酸痛、类风湿关节炎、发热等病症[1-2]。但目前临床应用的剂型仍是传统的汤散剂，存在携带不便、生物利用度差等问题，因此本项目为其确定适宜剂型，阐明其有效性及安全性，采用炭粒廓清法和2，4-二硝基氟苯（DNFB）所致的迟发性超敏反应法研究“玛奴西汤”颗粒对免疫功能的影响，为藏药“玛奴西汤”颗粒在临床中的应用提供依据。 　　1　仪器与试剂 　　1.1　实验仪器 　　秒表，粤飞亚运集团；紫外光栅分光光度计，型号：752，上海精密科学仪器有限公司；电子天平，型号：JD1060-2，沈阳龙腾电子称量仪器有限公司。 　　1.2　实验试剂 　　玛奴西汤颗粒，规格：30　g/袋，生产批号由青海省藏医药研究院基础研究所传统工艺室提供；醋酸泼尼松片，规格：5　mg/片，生产批号天津天药药业股份有限公司；生理盐水，生产批号：四川科伦药业股份有限公司；羧甲基纤维素钠，生产批号常州市武进庙桥第二化工有限公司；2，4-二硝基氟苯，生产批号成都市科龙化工试剂厂；丙酮，生产批号：2006年4月26日，天津市化学试剂六厂；硫化钠，生产批号：060320，成都金山化学试剂有限公司生产；碳酸钠，生产批号：030211，西安化学试剂厂；印度墨汁，生产批号：NBLD2012Y0518，北京诺博莱德科技有限公司；微量采血管，生产批号：201204，姜堰市健化医疗器械有限公司；静脉血样采集容器普通管，规格：5　mL，生产批号：120226，湖南省浏阳市医用仪具厂。 　　1.3　实验动物 　　昆明种小鼠，清洁级，体重18～22　g，合格证号：青医动字购于青海省实验动物中心。 　　2　方法与结果 　　2.1　实验方法 　　2.1.1　炭粒廓清法[3-4] 取18～22　g雄性小鼠60只，随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松组（10.0　mg/kg）、玛奴高剂量组（2.0　g/kg）、玛奴中剂量组（1.0　g/kg）、玛奴低剂量组（0.5　g/kg），每组10只。每组小鼠每日灌胃给药1次，连续给药7　d，给药量按小鼠体重折算，空白组和模型组给予蒸馏水。末次给药前禁食16　h，每组小鼠于末次给药后1　h于尾静脉注入用1%明胶溶液稀释4倍的印度墨汁（0.01　mL/g体重）。于注入墨汁后2　min及12　min用微量采血管从小鼠眼眶后静脉丛取血20　μL，立即吹入装有2　mL，0.1%　Na2CO3溶液的血液采集管中，并立即摇匀。以空白组血容液校零，用752型分光光度计在680　nm处测定吸光度A。后将小鼠颈椎处死，取脾脏、肝脏称重。并计算廓清指数：K=（lgA1-lgA2）/（t2-t1）（A1为2　min时血样的吸光度，A2为12　min时血样的吸光度，t1为第1次采血时间，单位为min，t2为第2次采血时间，单位为min）；吞噬指数：a=体重　×　K1/3/（脾重+肝重）（K为廓清指数）。 　　2.1.2　迟发性超敏反应[4] 取18～22　g小鼠60只，雌雄各半，分组与给药方法同“2.1.1”。于给药1　d后，每只小鼠用7%的硫化钠溶液涂抹腹部脱毛[5]，并在24　h后将5%　2，4-二硝基氟苯丙酮溶液50　μL均匀涂抹于小鼠腹部脱毛处致敏，继续给药7　d。末次给药前禁食不禁水16　h，每组小鼠于末次给药后1　h，于小鼠左耳两面均匀涂抹20　μL，1%2，4-二硝基氟苯丙酮溶液进行攻击，24　h后将小鼠颈椎处死，剪下小鼠左右两耳，用直径为7　mm的打孔器于小鼠左右两耳片同部位等面积铳下耳片，用精密电子天平称