叠鞘石斛化学成分研究及其综合利用与开发-中药学专业论文.docx

成都中医药大学 2010 级博士学位论文 I 摘 要 目的：本课题在科技部“十二五”支撑项目——石斛规范化种植基地及其 SOP 优化、升级研究（2011BAI13B02-8）的资助下，对川产道地药材叠鞘石斛与金 钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛之间及叠鞘石斛不同部位（茎、叶、花）化学成分 指纹图谱及含量进行对比研究，以期发现叠鞘石斛与三者间的生物亲缘关系及对 叠鞘石斛的综合利用提供参考；并对叠鞘石斛化学成分进行分离鉴定，阐明叠鞘 石斛的化学成分类型，为其质量控制提供一定的依据；并对叠鞘石斛进行配方颗 粒的制备研究，扩大其应用范围，增加种植者的经济收入，提高种植积极性，进 一步带来更大的效益，为石斛资源的可持续利用和合理开发奠定基础。 方法：采用薄层色谱法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色 谱等现代分析技术，从“薄层色谱——高效液相色谱——气相色谱——单体成??/ 组分含量”四个方面，对叠鞘石斛与金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛及叠鞘石斛 茎、叶、花化学成分进行对比研究；采用现代色谱分离方法及分析手段，对叠鞘 石斛化学成分进行分离鉴定，并对其进行含量测定；从提取、干燥工艺，辅料选 择，成型工艺等方面对叠鞘石斛配方颗粒进行制备工艺研究。 结果：四种石斛对比 叠鞘石斛中含有石斛酚，但未检出石斛碱和毛兰素。TLC 与 HPLC 结果互 为补充，直观显示四种石斛在化成成分上的异同点。脂溶性成分 GC-MS 对比分 析结果对其具有一定的相同成分作出了验证。相同色谱信息表明具有同化学成 分，作为同属植物其可能具有相类似的功效；特异性色谱信息表明其在化学成分 上有所差异，在具体功效主治上是否完全相同应加以重视；对比结果提示叠鞘石 斛及流苏石斛化学成分的研究具有较大的潜力。 含量测定结果显示，在糖类成分含量上金钗石斛与流苏石斛较为接近，鼓槌 石斛与叠鞘石斛较为接近，推测其在调节机体免疫、抗肿瘤及调节血糖等方面具 有类似药效，但在使用剂量上应有所不同。四种石斛中石斛酚含量差异较大，流 苏石斛与叠鞘石斛中含量较高约为 220μg/g，提示其在抗糖尿病性白内障方面具 有一定的研究价值。 通过游离糖类衍生化后 GC-MS 分析结果可知，四种石斛中均主要检出鼠李 II 糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖，均未检出乳糖，金钗石斛亦检出含有半乳糖。 叠鞘石斛茎、叶、花对比 TLC 对比结果显示，叠鞘石斛茎的色谱斑点较为丰富；HPLC 对比结果显示， 叶和花色谱峰信息较为丰富，且与茎中化学成分具有一定的相似性，推测其可能 具有相同的化学成分及类似功效。GC-MS 结果显示叠鞘石斛茎、叶、花有 4 种 共有成分，且茎与叶、花分别有 8 种、13 种共有成分；茎中烷烃类成分含量较 高，而叶和花中脂肪酸、酯类含量较高，且成分种类明显多于茎；提示叠鞘石斛 叶化学成分具有一定的研究意义，可为其综合利用提供依据。 糖类成分含量测定结果表明，茎中除还原糖含量明显低于叶外，多糖及水溶 性总糖的含量均高于叶中含量。测定结果提示可对叠鞘石斛叶在多糖所具的药理 活性方面具有一定的研究价值。 叠鞘石斛化学成分分离鉴定及含量测定 对叠鞘石斛乙酸乙酯部位化学成分进行分离纯化，共鉴定出 17 个化合物， 其中 4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲、丁香酸、大黄素、松柏醛、香兰素、邻 苯二甲酸二（2-乙基）己酯、5-乙酰氧甲基糠醛、丁香醛、5-羟甲基糠醛、香草 酸均为首次从叠鞘石斛中分离。 采用 HPLC 法对叠鞘石斛中 4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲含量进行测定， 结果表明其含量为 17.42μg/g，其含量测定结果为叠鞘石斛的质量控制提供了一 定的参考。4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲及柚皮素分离纯化，为叠鞘石斛具 有抗癌活性的药理作用提供了一定的依据；石斛酚与丁香酸的分离纯化，为叠鞘 石斛在抗糖尿病性白内障方面可能具有药理活性提供了一定的参考。 叠鞘石斛配方颗粒制备工艺研究 通过实验研究，确定了叠鞘石斛配方颗粒的制备工艺；通过中试研究，证明 该工艺可用于工业化生产且稳定可行；对中试样品进行含量测定，其指标性成分 转移率达 82.8%，表明该工艺符合工业化生产要求。该配方颗粒的研制，为扩大 叠鞘石斛市场范围及其后续产品开发奠定了基础。 结论：通过对比研究，为叠鞘石斛的药用价值及综合利用提供了一定的参考； 化学成分的分离为叠鞘石斛的物质基础及药理活性提供了一定的支持；含量测定 结果为叠鞘石斛的质量控制提供了一定的依据；配方颗粒的制备研究，为扩大叠  PAGE 5 鞘石斛市场应用及后续产品开发奠定了基础。 关键词：石斛；叠鞘石斛茎、叶、花；化学成分分离；配方颗粒  Abstract Objective: Comparative studie betw