逍遥散含药血清对未孕大鼠离体子宫平滑肌作用研究.docVIP

逍遥散含药血清对未孕大鼠离体子宫平滑肌作用研究 　　摘要：目的观察逍遥含药血清对正常大鼠离体子宫平滑肌运动的影响，并探讨其作用机制。方法运用Powerlab生物信号系统记录大鼠离体子宫肌标本的活动，观察不同浓度组逍遥散含药血清对子宫平滑肌收缩时间、最大张力、子宫活动力的影响。结果：逍遥散含药血清对正常大鼠离体子宫肌有明显的兴奋作用，可增强其收缩时间、最大张力和子宫活动力（与空白血清组比较，P0.01），且兴奋作用强度与含药血清的浓度有相关性（高浓度和低浓度血清组比较P0.05）。逍遥散含药血清的这一作用可被异搏定和阿托品阻断（与血清组比较P0.01）。结论逍遥散含药血清在体外可增强正常家兔子宫平滑肌的收缩，该作用可能是通过L型钙通道和M受体发挥作用。 　　关键词：逍遥散；含药血清；子宫肌标本 　　中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1007-2349（2016）11-0077-03 　　逍遥散源于宋代《太平惠民和剂局方》，其方药组成为：柴胡、芍药、白术、茯苓、当归、生姜、薄荷、甘草，具有疏肝解郁、养血健脾的作用。临床上逍遥散广泛用于治疗肝郁血虚脾弱所致的各科疾病，尤其是各种妇科疾病[1-3]。现代药理研究发现逍遥散具有抗抑郁症及肠易激综合症、抗癌、防治肝纤维化、调节神经内分泌等多方面作用[4-6]。本实验用血清药理学的方法研究逍遥散含药血清对离体子宫肌的作用，并对其作用机制进行探讨。 　　1制备逍遥散含药血清 　　1.1材料 　　1.1.1药品逍遥散原方不变，药物剂量参考《方剂学》教材第六版：柴胡、当归、芍药、白术、茯苓各9 g，甘草4.5 g，烧生姜一块，薄荷少许。所用生药经鉴定，均为正品。 　　1.1.2动物SPF级未孕SD大鼠（昆明医学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK（滇）2011-2014），体重180±30 g，本院动物房饲养，普通饲料，自主饮食。 　　1.1.3仪器离心机、恒温水浴锅（DZKW-C；北京光明医疗仪器厂）。 　　1.2方法 　　1.2.1逍遥散水煎剂制备和浓缩上述八味药用六倍于生药量的水浸泡30 min，分别按20、15、15 min煎煮3次，用六层纱布过滤，并浓缩成每1 mL含5.2 g 、2.6 g生药量的药液，置于4℃冰箱中贮存备用。 　　1.2.2分组给药SPF级未孕SD大鼠60只，随机分为空白血清组，0.9%生理盐水；含药血清高浓度组，5.2 g/mL逍遥散水煎剂；含药血清低浓度组，2.6 g/mL逍遥散水煎剂。经灌胃途径给药，1.5 mL/100 g/次，每天2次，连续3 d。 　　1.3.3逍遥散含药血清制备于第3日末次给药后腹腔注射25%乌拉坦（4 mL/kg），并于给药后60 min腹子宫采血，静置30 min后，以3000转?M分速度离心10 min，取上清液，分装，-20℃保存待用，用前56℃30 min灭活。 　　2逍遥散含药血清对大鼠离体子宫肌的作用 　　2.1材料 　　2.1.1试剂垂体后叶素（上海第一生化药业有限公司，批号：060403）、己烯雌酚（合肥久联制药有限公司，批号：060301）、消炎痛（山西太原药业有限公司，批号：071202）、酚妥拉明（诺华制药，批号：060156）、阿托品（天津药业集团新郑股份有限公司，批号：060413）、苯海拉明（天津药业集团新郑股份有限公司，批号：0702051）、异搏定（江苏四环生物股份有限公司，批号：0707131）、洛氏液（NaCl 9g，KCl 0.42g，CaCl2 0.24g，NaHCO3 0.2g，Glucose.l 0g，蒸馏水1000mL）。 　　2.1.2仪器Powerlab/8s生物信号采集处理系统（澳大利亚埃德公司）、张力换能器（澳大利亚埃德公司，型号：ML784）、循环灌流恒温平滑肌槽、离心机、冰箱、电子天平、哺乳动物手术器械等。 　　2.1.3动物SPF级未孕SD大鼠8只（昆明医学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK（滇）2011-2014），体重180±30g，本院动物房饲养，普通饲料，自主饮食。 　　2.2方法 　　2.2.1大鼠子宫平滑肌标本的制备将未孕雌性大鼠于实验前两天，每天皮下注射己烯雌酚0.1mg/kg，促使动物处于动情期或动情前期，以提高动物对药物的敏感性。第3天，末次促情1h后，用颈椎脱臼法迅速处死大鼠，剖腹取出子宫，立即将其浸入到盛有洛氏液的平皿中，漂洗，分离周围的脂肪组织，制成长约1.0cm的子宫平滑肌条，放入洛氏液中待用。 　　2.2.2离体实验将子宫肌标本悬挂于含（37.5士0.5℃，pH=7.4）洛氏营养液的恒温平滑肌槽中，一端固定于浴槽底部，另一端与张力换能器连接。向恒温平滑肌槽中通入含有95%O2和5%CO2