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超声辅助提取渐尖毛蕨总黄酮工艺研究 　　摘要：采用正交优化试验，以总黄酮得率作为考察指标，对影响超声辅助渐尖毛蕨总黄酮提取的因素进行了研究。结果表明渐尖毛蕨总黄酮的最佳提取工艺条件：乙醇浓度为60%，时间为40min，料液比为1∶30，温度为60℃。在最佳提取条件下，其得率可达43.62mg/g。 　　关键词：渐尖毛蕨；总黄酮；超声辅助；提取工艺 　　Abstract：The factors of ultrasonic assisted extraxtion of total flavonoids from Cyclosorus acuminatus was studied by the orthogonal test in this paper.The results showed that the optimal extraction conditions were as flows：alcohol concentratrion 60%，extraction time 40 min，material liquid 1：30，temperature at 60℃.The yield can reach 43.62mg/g under the optimum extracting conditions. 　　Key words：Cyclosorus acuminatus；Total flavonoids；Ultrasonic assisted；Extraction technics 　　重庆缙云山的已经记载蕨类植物有38科74属，149种，4变种。其中渐尖毛蕨Cyclosorus acuminatus（Houtt.）Nakai为金星蕨科毛蕨属植物[1]，属于缙云山广布种，资源丰富，生于路边湿地或沟边、林缘。药用。黄酮类化合物是植物的次级代谢产物，现代医学研究表明，黄酮类化合物具有明显的抗溃疡、解痉、抗炎、抗菌、抗氧化、抗衰老、增强免疫力、软化血管、降血糖及降血脂等生理活性作用；如何在植物中提取黄酮类化合物进行了广泛的研究，但是目前中国对于渐尖毛蕨黄酮类化合物提取分离和应用的研究较少[2～10]。本文采用单因素和正交试验方法研究超声辅助对渐尖毛蕨中总黄酮提取效率的影响，为更合理开发利用蕨类药用植物提供理论参考。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 渐尖毛蕨于2014年5月采重庆市沙坪坝区缙云山海拔400m处（经本校生药学博士费曜鉴定），干燥，用粉碎机粉碎，过5目筛；盐酸（重庆川东化工（集团）有限公司）；镁粉（湖北省天门市化学试剂厂）；三氯化铁；芦丁标准品（UV≥98%，批号：130507，北京德威钠生物技术有限公司）；Al（NO3）3?9H2O（上海振欣试剂厂，AR）；NaNO2（重庆北碚化学试剂厂，AR）；NaOH（重庆博艺化学试剂有限公司，AR）。 　　FW177型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；DGG-9240B型电热恒温鼓风干燥箱（上海森信实验仪器有限公司）；SF-400A电子天平；RE-52旋转蒸发仪器（上海亚荣生化仪器厂）；电磁炉（格兰氏生活电器）；药典筛（浙江上虞市五四仪器厂）；TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用电器有限责任公司）；UV-1200型紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；SB-5200DT超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司，200W）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）。 　　1.2方法 　　1.2.1标准曲线的制作 精密称取在干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置50ml量瓶中，加70%乙醇适量，超声使其溶解，放冷后加70%乙醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml分别置于15ml具塞试管中，加5%亚硝酸钠溶液0.5ml，摇匀，放置6min；加10%硝酸铝溶液0.5ml，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠溶液5ml，摇匀，静置15min，于510nm处测吸光度。以浓度（C）与吸光度（A）进行直线回归，得方程：A=1.8064C-0.0188，r=0.9983。结果表明，在0.04～1.60mg/ml范围内，吸光度与芦丁溶液浓度呈现良好线性关系。 　　1.2.2渐尖毛蕨总黄酮含量及得率的测定 精密称取渐尖毛蕨粉末1g（过药典筛3号筛），置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇20ml，30℃超声提取2次，30min/次，抽滤，合并2次滤液，水浴蒸干，残渣加适量70%乙醇溶解转移至50ml量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，即得渐尖毛蕨供试品溶液。精密吸取样品溶液1mL，按“1.2.1”项下方法显色后立即测定吸光度，由回归方程计算出供试样品中总黄酮的得率。总黄酮得