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饲料产品中转基因成分分析及问题研究
饲料产品中转基因成分分析及问题研究
摘 要:随着农业的发展,对于转基因饲料的应用已经逐渐普及,但由于转基因产品中存在一定的危险性,对其成分的分析和问题的探究要给予重视。因此,本文针对饲料产品中转基因成分的分析及问题做出了进一步探究,对当前转基因产品的标志管理现状、饲料中转基因成分的定性检测方法、饲料中转基因成分的定量检测方法给出了详细的分析。
关键词:饲料产品;转基因;分析;问题
转基因的发展非常迅速,大众对于转基因产品的安全性也给予了高度的关注,很多国家对转基因产品制定了相应的管理方案,严格管理转基因植物的加工生产以及贸易出口等,各个国家对转基因产品的管理有着不同的标准和要求,因此比较粗略的转基因技术并不能满足复杂产品的转基因检测。鉴于此情况,本文针对饲料产品中转基因成分的分析及问题做出了以下探究。
一、当前转基因产品的标志管理现状
每个国家对于饲料转基因成分有着不同的规定及管理,其中主要包含自愿标识以及强制性标识两个种类。在1997年,欧盟首先实施了转基因产品的标识制度,之后在50多个国家和地区中先后颁布了标识制度,其中每个国家的制度和阈值如表一所示。除了美国、加拿大以及阿根廷等国家以外,很多国家都应用了强制性标识的制度,其阈值范围从欧盟0.9%直到日本的5%。我国于2002年发表了对于转基因生物进行管理的办法,第一批被列入到标志管理的目录有大豆类产品,如种子、油和豆粉等;玉米类产品如玉米粉和油等;还有油菜籽、棉花类产品等。面对众多的转基因产品,行之有效的检测方式以及精准的定量描述是转基因标志制度的基础。因为对其进行测定方式的依据存在不同的基准物质,并且饲料加工会包含很多的转基因作物等,对转基因成分含量进行检测和相应的表示方式会存在一定的差异,即使是相同的数值也很有可能表示不同的含义,因此直接给出相应标志的工作存在一定的困难。
二、饲料中转基因成分的定性检测方法
1.生物分析法
生物分析法为利用转入目的基因进行表达的特殊性状,对转基因产品进行鉴定的一种方法。例如:含有β-胡萝卜素的转基因水稻、甜度高但是糖份含量低的玉米。利用这样的形式,可以有效实现对原料进行第一步筛选,但因为很多转基因当中表达出的特殊性,如抗病虫害等在作物生长中的体现,不能用在实验室的检测当中。
2.DNA检测法
(1)核酸的提取纯化。对核酸进行提取的目的是为后续提供合理的DNA分析。DNA的质量涵盖对DNA分子平均长度、化学纯度以及DNA序列、双螺旋完全性的提取等。在对DNA进行提取的过程中,要对能够抑制PCR反应蛋白质、纤维素等进行弃除。依照GB/T19495.3-2004可以得出,对不同DNA进行提纯的方式,可以应用在不同的样品中。当前,可以提取在饲料当中进行应用的转基因成分的核算,有很多种方式,其中有三氯甲烷法、聚乙烯吡咯烷酮法、硅土法及胍 - 三氯甲烷法、CTAB法。并且对于这几种方式的应用,已经在对饲料样品的检验中取得了成功。在这几种方法中,对于CTAB的应用,更多的应用在了对饲料样品的DNA提取中,并且成功应用在了提取玉米、菜籽粕以及大豆蛋白的DNA中。但是,为了能够更好的保障提取的DNA质量,对各个样品进行提取的具体方式,要依照不同作物的成分特征,结合DNA的具体提取原理和以往的经验对其进行合理的改进,并将各种方式进行比较和对比,挑选出最佳的提取方法。例如:如果提取的样品含有很高的盐分,可用清水清洗几遍;鱼骨粉等要先将杂质去除,之后在应用CTAB法对样品进行制备。
(2)定性PCR法。该项方式的原理为,利用筛选样品目标的核算序列以及定性分析异性检测,在对照合理以及检测下限合适的状况下,实施定性检测的结果要对样品是否为转基因产品进行明确的判断.此种检测方式包括扩增目标序列、检测及扩增片段特异性的?_证。这种检测的方式具有极强的灵敏性,并且简便快速,是对GMF进行检测的最佳方式,但该项方式的应用容易产生假阳性的结果。所以,一般需要通过其它的方式进行验证,如应用PCR的产物与PCR凝胶回收的产物,利用凝胶电池实施检测。借助对限制性内切酶切的具体分析,以及序列和杂交的分析等方式实施确认。在应用实时荧光PCR的方式实施检测的过程中,要对扩增和检测一同进行。
使用以及存在的问题有:利用PCR法定性来检测饲料当中的转基因成分是当前应用最广泛的鉴定形式,并且该种方式在对转基因大豆、小麦和玉米的检测研究中获得了非常大的成功。我国分别制定了 NY/T 675-2003《转基因植物及其产品检测大豆定性 PCR 方法》标准,可应用在转基因抗草甘膦大豆以及相关的产品中、转基因抗草丁膦大豆和相关的产品等,涵盖大豆的种子、豆粕和大豆粉等相关制品的转基因成分定性PCR的具体检测;SN/T 1196-
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