龙血竭总黄酮对新西兰兔心肌缺血再灌注损伤作用研究.docVIP

龙血竭总黄酮对新西兰兔心肌缺血再灌注损伤作用研究 　　[摘要]目的研究龙血竭总黄酮对新西兰兔心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法将30只新西兰兔随机分为三组，每组10只。采用结扎新西兰兔左冠状动脉前降支法，建立心肌缺血/再灌注损伤模型。观察心肌组织HE染色的结构变化，测量左心室内压最大上升速率（+dp/dtmax），检测心肌肌酸激酶同工酶（CK-MB）。结果龙血竭处理组心肌组织结构明显好于缺血/再灌注组；缺血/再灌注组和龙血竭处理组+dp/dtmax均明显低于假手术组（P0.01），龙血竭处理组+dp/dtmax高于缺血/再灌注组（P0.01）；缺血/再灌注组CK-MB水平明显高于假手术组（P0.01），龙血竭处理组CK-MB水平高于假手术组（P0.05），并低于缺血/再灌注组（P0.01）。结论龙血竭总黄酮能够改善心肌缺血/再灌注损伤，保护心肌组织结构，稳定细胞膜结构，减少心肌CK-MB漏出，提高缺血/再灌注损伤模型心肌的收缩功能。 　　[关键词]缺血/再灌注损伤；龙血竭总黄酮；左心室内压最大上升速率；肌酸激酶同工酶 　　中图分类号：R542.2 文献标识码：A 文章编号：1009-816X（2017）03-0203-03 　　doi：10.3969/j.issn.1009-816x.2017.03.15 　　据研究我国急性心肌梗死发生率2008年与2002年比较呈上升趋势，冠心病死亡粗率城市地区上升2.40倍，农村地区上升2.84倍，2008年冠心病死亡粗率城市居民为91.41/10万，农村居民为51.89/10万。急性心肌梗死病死率升高的诸多因素中心功能不全是第一位危险因素。即使冠状动脉血运重建技术日益完善，而血管再通后的死亡总人数逐年升高，有必要找到新的治疗方法，降低血管再通后的死亡率。中药是我国长期治病防病实践过程中积累的宝贵财富，具有极大的应用价值。龙血竭是广西传统名贵壮药，从百合科植物剑叶龙血树的含脂木材提取得到的树脂，其性温、平，味甘，无毒。具有抗菌、抗痉挛、消炎及镇痛等效果，还存在有抗糖尿病及抗肿瘤的活性，同时也具有增强免疫功能，促进皮肤修复、止血及增强血液循环等功效。此次实验是通过新西兰兔心肌缺血/再灌注模型，研究龙血竭总黄酮对新西兰兔心肌缺血/再灌注损伤的保护作用，为治疗心肌缺血/再灌注损伤找到新的治疗措施，降低心肌梗死的死亡率。 　　1材料和方法 　　1.1动物：新西兰兔，体重为2.0～3.0kg，雌雄不限。右江民族医学院实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK桂2012-0003。 　　1.2分组、造模：将30只新西兰兔随机分成三组：假手术组、缺血/再灌注组、龙血竭处理组，雌雄不限，每组10只。假手术组与缺血/再灌注组每天0.9%氯化钠注射液5ml灌胃，龙血竭处理组用龙血竭总黄酮180mg/kg?d溶于5ml 0.9%氯化钠注射液灌胃。手术前灌胃给药，连续给予10天。手术前禁食12小时，按照1.0g/kg应用20%氨基甲酸乙酯耳缘静脉注射麻醉新西兰兔，仰卧位固定手术台上，四肢皮下连接ECG-6511型心电图机（上海光电医用电子仪器有限公司），监测动物心电图，剪去颈部毛发，切开皮肤，暴露气管，行气管插管，连接V-100型小型动物呼吸机（上海玉研科学仪器有限公司X呼吸频率：45～50次/分钟，潮气量16～20ml，呼吸比1：1）。参照Cheng文献方法造模。造模过程中，Ⅱ导联ST段弓背抬高，心肌组织变为暗红色为造模成功。龙血竭总黄酮由桂林三金药业药品研究所提供，红褐色粉末状，应用0.9%氯化钠注射液作为溶剂。20%氨基甲酸乙酯（成都市科龙化工试剂厂），肌酸激酶同工酶（CK-MB）测定试剂盒（德赛诊断系统上海有限公司）。 　　1.3检测指标：测量新西兰兔左心室内压最大上升速率（+dP/dtmax），采取血液和心肌组织标本所有实验动物均在心肌再灌注2小时时，用15G注射针头连接医用动脉测压管，动脉测压管再连接到BL-420E+生物机能实验系统（成都泰盟科技公司），将注射针头直接从心尖部插入左心室，测量左室内压，得到+do/dtmax。直接从右心房取5ml血液，离心得到血清，保存-20℃冰箱备用。将心脏分离出体外，选用颜色较深的左心室前壁心肌组织10%中性福尔马林固定，以备HE常规染色。实验全部结束后，利用日立7600全自动生化分析仪检测血清CK-MB。 　　1.4统?学处理：应用SPSS 17.0统计学软件进行统计学分析，计量资料用（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，再两两比较用LSD方法，P0.05为差异有统计学意义。 　　2结果 　　2.1缺血/再灌注对新西兰兔心肌组织的影响：假手术组：心肌组织HE染色浓淡均匀一致，细胞核清晰可见，心肌纤维结构清楚，排列整齐有序（图