乙肝表面抗体定性与定量两种检测方法相关性分析.docVIP

乙肝表面抗体定性与定量两种检测方法相关性分析 　　摘要：目的 通过分析比较两种检测方法（ELISA法定性与电化学发光法定量）检测乙肝表面抗体（抗-HBs）的结果差异，探讨测定乙肝表面抗体（抗-HBs）的浓度值与定性检测结果s/co值之间的关系及对临床工作的指导意义。方法 用ELISA法定性与电化学发光法定量分别对96份标本进行检测分析。结果 电化学发光法结果在10mIU/ ml和大于100mIU/ml的标本ELISA基本能准确判定为阴性或阳性，但在10～100mIU/ml之间的标本，36例仅有26例显示阳性，有10例则显阴性，阳性符合率仅达72.2%，96例标本中用电化学发光法检测阳性率为68.8%，而用ELISA法检测仅为59.3%，阳性率差异显著。结论 电化学发光法作为一种高灵敏、高特异、高准确的检测方法在测定乙肝表面抗体值得大力推广应用，在指导乙肝疫苗接种工作方面具有重要意义。 　　关键词：乙肝表面抗体（HBsAb）；酶联免疫吸附法（ELISA）；电化学发光法 　　乙肝表面抗体（HBsAb）是对乙肝病毒免疫的保护性抗体。它的阳性表明既往感染过乙肝病毒，但已经排除病毒，或者接种过乙肝疫苗，产生了保护性抗体。血清中乙肝表面抗体滴度越高，保护力越强。我国人口多乙型肝炎病毒感染数量多，人群发病率较高，据统计乙型肝炎病毒的携带率可达15%左右[1]。而乙肝疫苗的主动免疫是预防乙肝的最有效途径。只有HBsAg在血中保持一定的含量，机体才能有能力抵抗乙肝病毒的入侵。酶联免疫吸附法（ELISA）因其简便、 快速、费用较低成为目前检测HBV标志物最常用的方法，但其具有无法定量的缺点[2]。近年来，由于检验技术的不断发展，电化学发光法成为定量检测乙肝抗体的方法之一，但其具有检测时间较长、费用较高的缺点。本文分别采用定性和定量两种方法对乙肝表面抗体进行检测，并分析其相关性。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 96名，均为2013年8月～10月在我院进行体检的健康人群，所有人均空腹抽取静脉血并及时分离血清，分别用ELISA法定性和电化学发光法定量检测乙肝表面抗体。 　　1.2仪器 ELISA法仪器为KC-100酶标仪（深圳凯特生物医疗电子科技有限公司）；电化学发光仪器为罗氏E601电化学发光分析仪。 　　1.3试剂 ELISA法试剂为上海科华生物工程有限公司生产。电化学发光法试剂为罗氏公司生产。 　　1.4方法及操作 ELISA法：每孔加入待测样本50？滋L，设阴阳对照各2孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各50？滋L（或1滴），并设空白对照1孔。每孔加入酶结合物50？滋L，充分混匀，封板，置37℃孵育30min。手工洗板：弃去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置5s，甩干，重复5次后拍干。每孔加显色剂A液、显色剂B液各50？滋L，充分混匀，封板，置37℃孵育15min。每孔加入终止液50？滋L，混匀。用酶标仪读数，取波长450nm，读取各孔OD值。 　　电化学发光法：采用磁性微颗粒两步法电化学发光分析技术。 　　1.5结果判定 ELISA法： cut off value（cov）= 阴性对照平均OD值×2.1，样品OD值小于cov值时，说明该抗体检测结果为阴性； 样品OD值大于等于cov值时，说明该抗体检测结果为阳性。电化学发光法定量检测HBsAb滴度大于10mIU/ml为阳性，检测HBsAb滴度大于100mIU/ml为有效免疫。 　　1.6统计方法 SPSS17.0对2种方法检测结果进行χ2检验。 　　2结果 　　两法阳性率比较ELISA法以s/co≥1.0为阳性， 化学发光法10mIU/ml判为阳性。 两种方法对乙肝表面抗体的对比检测结果分别见表1，表2。 　　由表1 、表2可以看出，HBsAb浓度值小于10mIU/ml和大于100mIU/ml时，电化学发光法和ELISA法检测结果相近，用ELISA法基本能准确判定阳性和阴性。但在10～100mIU/ml之间的标本电化学发光法共检测的36例阳性样本，ELISA法只有26例是阳性。以10～50mIU/ml区段尤为显著。整体来看电化学发光法检出阳性率为68.8%，ELISA法检测阳性率为59.3%。2种方法检测差异显著，有统计学意义（P0.05）。 　　3 讨论 　　在我国乙肝的感染率较高，由于HBsAb是一种保护性抗体，一旦人体受到隐性感染或经急性感染乙肝病毒并清除后，会产生HBsAb。若人群接种乙肝疫苗后，机体也可产生HBsAb。人体内的较高浓度的HBsAb可有效清除机体感染的乙肝病毒。同时乙型肝炎又与肝癌的发生有密切的关系，因此，为防止乙肝的蔓延，要想达到控制乙型肝炎的的目的，就应该采用减少易感人群的方式。据相关资料报道，HBsAb含量在10mIU/ml