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细菌芽孢理化性质与耐热机制研究 　　摘要：在前人对嗜热菌与芽孢的理论研究上分析讨论，主要在脂膜，基因，蛋白空间结构等对芽孢的性质和耐热机理方面作出解释，并在此论据上提出了合理推理，最后在对已有的芽孢的主要应用方面作了适当介绍和展望。 　　关键词：芽孢耐热脂膜基因蛋白 　　中图分类号：Q2文献标识码：A文章编号：1007-3973（2012）004-102-02 　　1细菌芽孢的概念和产芽孢菌的分类 　　1.1芽孢的概念 　　某些特殊的细菌多为杆菌，在一定的条件或者生长至一定的时期后，在胞内基因的调控下，细胞停止分裂和生长，胞质高度浓缩脱水，并在细胞的中部、后部或侧部都可能产生一个圆形或椭圆的强抗逆性芽孢球体并从芽孢囊中释放出来，因其从内部芽孢囊中释放，所以又被称为内生孢子。 　　1.2芽孢杆菌的分类 　　随着时间的推移，技术的改进和理论的深入，对于芽孢杆菌的分类也从简单到复杂，从外形，表观逐渐深入到基因，DNA的分子化学水平上。 　　刘国红，林乃铨等在前人基础上介绍了一些微生物的分类学方法，如从表观入手的经典分类法，建立于微生物分类学的基础上的数值分类法，以PCR、G+C%、DNA重组、16s rDNA的测序等为基础的分子分类法，以脂肪酸鉴定为代表的化学分类法，和以综合信息出发的的多相分类法。而根据1991年Ash等人研究51个菌株的rRN A序列后，得出至少存在5个发育类群。到目前为止，已从Bacillus分化和建立了34个新属。 　　1.3芽孢形成的原因和过程 　　芽孢形成的原因可分为两种：(1)由于环境因素，由于外部环境的刺激或影响其自身产生的有害物质积累使得菌体有关芽孢的基因表达从而进入产生芽孢的一系列反应。(2)菌体自发进入芽孢阶段，由于该菌体中控制细菌进入芽孢的基因在某段时期进行表达而进入该时期。 　　范玉贞在对细菌芽孢的基因表达调控研究中从分子学角度指出，大多数细菌主要在营养缺乏或者在对数生长末期形成芽孢，主要是由于葡萄糖的一些代谢产物和氨基酸代谢产物，尤其是GTP对芽孢基因表达的抑制，在对枯草芽孢杆菌研究中，主要集中于?%l亚基对RNA聚合酶的调控作用，RNA聚合酶核心酶的组成主要有五个亚基2?%Z，?%[，?%[′，?%r全酶则还有?%l亚基，?%l因子是核心酶之外的单独组分，其对正确识别启动子的转录是必要的，而这一作用是主要通过对非特异性DNA序列结合率的降低和加强对识别特异启动子而实现的。不同的启动子要与不同的?%l因子结合，因此菌体内存在多种?%l因子，并结合于-10和-35的保守序列上。 　　枯草芽孢杆菌有着复杂的转录系统，其有关的?%l因子有5种，因此可形成5种不同的全酶，在不同环境结合不同启动子，?%l亚基一般的更换次序为?%l55、?%l28、?%l32、?%l37、?%l29。营养阶段一般只含有?%l55，其RNA聚合酶只能与营养基因和少数最初在芽孢形成阶段所需基因(SPoO基因)的启动子结合,因而它主要负责转录与营养生长有关的基因和SPoO基因。并产生少量?%l28，因此其全酶在营养细胞中亦较少，不会指导形成芽孢，而在芽孢形成过程中则是由?%l32和?%l37负责识别不同的转录启动子的RNA聚合酶，?%l29则能转录中、晚期芽孢基因。由此可知,枯草杆菌的营养细胞能测定环境中营养物质的变化,并通过特点的一种信号传递方式,把外界物质变化的信号传到细胞内。并根据供应情况,随时主动调整自身的基因表达,并通过?%l55、?%l28、?%l32、?%l37、?%l29依次替换的方式,使得芽孢基因有序表达。如转录合成2,6—吡啶二羧酸(DPA)、芽孢外壳蛋白等芽孢特有的酶,然后由这些酶催化合成芽孢特有的成分。 　　形成过程：营养细胞—DNA浓缩变稠—轴丝渐成—形成隔膜—形成前芽孢体—吞没前芽孢—形成皮层—形成芽孢壳—芽孢游离 　　1.4芽孢结构 　　芽孢壁厚而密，分三层：外层是芽孢外壳，为蛋白质。中层为皮层，由肽聚糖构成，含大量DPA。内层为孢子壁，由肽聚糖构成，包裹细胞质和核质。芽孢原生质体含有极高的DPA-Ca2+，在新合成、具有特殊化学构造的外层（皮层和孢子衣，芽孢外壁）中也有这种物质。芽孢壁含有一种与营养细胞壁组成不同的特殊肽聚糖。 　　1.5芽孢的耐热机理 　　(1)相关学说 　　芽孢的耐热机理至今在科学界还无准确的定论，而最近综合各项相关研究的比较有说服力的是渗透调节皮层膨胀学说，该学说认为，芽孢外层所包裹的疏水性角蛋白（芽孢衣），对阳离子和水通透性较差，而离子强度较强的皮层可掠夺核心区水分，使芽孢核心部分失水而皮层吸水膨胀，使得芽孢抗热性增加。另外，还有学说提出Ca2+-DPA会使芽孢中产生一种热稳定的凝胶。这是根据芽孢产生中形成的大量Ca-DPA而进