心房颤动患者心房组织中微小RNA―21与金属基质蛋白酶―2表达水平改变及意义分析.docVIP

心房颤动患者心房组织中微小RNA―21与金属基质蛋白酶―2表达水平改变及意义分析 　　【摘要】 目的：分析金属基质蛋白酶-2和微小RNA-21在心房颤动患者心房组织中的表达变化。方法：选取笔者所在医院在2012年10月-2013年10月收治的行瓣膜置换术的110例心脏瓣膜病患者作为研究对象，其中有55例合并慢性心房颤动（观察组），55例为窦性心律（对照组），对两组患者心肌组织中的微小RNA-21及MMP-2（金属基质蛋白酶-2）进行检测、分析。结果：观察组患者的MMP-2水平、CVF及微小RNA-21水平均高于对照组，两组比较差异有统计学意义（P0.05）。结论：心房组织MMP-2正向上调及微小RNA-21水平上升会对胶原代谢产生影响，导致心房重构，其与心房颤动的发生、发展有着密切关系。 　　【关键词】 金属基质蛋白酶-2； 微小RNA-21； 心房组织； 心房颤动 　　中图分类号 R541.75 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2014）18-0149-02 　　心律失常以心房颤动最为常见，心房颤动的发生机制十分复杂，目前还没有明确的解释[1]。大部分学者认为，心房颤动的发生主要与心房内的折返发生基质、心房电重构及结构重构有关。现有研究显示，在众多心血管疾病中，微小RNA都与患者的生理、病理发展有着密切联系[2]。探讨金属基质蛋白酶-2和微小RNA-21在心房颤动患者心房组织中的表达变化，报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取笔者所在医院在2012年10月-2013年10月收治的行瓣膜置换术的110例心脏瓣膜病患者作为研究对象，其中有55例合并慢性心房颤动（观察组），55例为窦性心律（对照组），两组患者的NYHA分级均为Ⅱ级或Ⅲ级。经实验室检查、体格及病史检查，两组患者均无肾脏病、心肌病、冠心病、肺源性心脏病、甲亢、高血压等疾病。观察组男29例，女26例，年龄53～78岁，平均（63.8±5.1）岁，心房颤动持续时间均超过6个月；对照组男28例，女27例，年龄55～77岁，平均（64.2±4.8）岁，均无心房颤动病史。两组患者年龄、性别等一般资料比较差异均无统计学意义（P0.05），具有可比性。 　　1.2 方法 　　两组患者均在行瓣膜置换术时，采集约200 mg右心耳组织，使用生理盐水冲洗干净，剔除脂肪，然后使用液氮保存。（1）微小RNA-21检测。取100 mg左右的心肌组织，使用minRcte微小RNA分离提取试剂盒，从组织中提取RNA。转录RNA，获得cDNA，然后使用Allinone microRNA qRT-PCR检测试剂盒，进行微小RNA表达检测。（2）MMP-2检测。取50 mg左右的心肌组织，剪碎后放入蛋白抽提缓冲液中，离心20 min，转速1200 r/min，离心操作在4 ℃下进行，取上清液，测定蛋白质含量。在蛋白上样缓冲液中加入等量的蛋白质样品，煮沸3 min，做SDS PAGE电泳，将蛋白质转移到PVDF膜上，封闭2 h，过夜。洗膜后将抗兔单克隆IgG加入其中，常温放置1 h后，使用化学发光试剂进行检测。并取适量心肌组织，做免疫组化检测。 　　1.3 统计学处理 　　采用SPSS 17.0软件分析，计量资料用（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用字2检验，P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　观察组患者的MMP-2水平、CVF及微小RNA-21水平均高于对照组，两组比较差异有统计学意义（P0.05），见表1。 　　3 讨论 　　在心房组织发生纤维化改变后，就会对心房内的电信号传递产生影响，导致心房肌活动增加不均一，从而形成心房颤动基质[3-5]。心肌纤维化与基质降解有着密切关联，MMPs（基质金属蛋白酶）作为胶原降解的关键水解酶系统，其维持着胶原重组与降解间的平衡，是心房结构重构的关键。micro RNA（微小RNA）是单链RNA分子，其含有22个核苷酸，能在与mRNA碱基配对后，抑制靶mRNA翻译或使其降解，以调控基因转录表达[6]。 　　近年来，微小RNA已经成为了医学界的一个研究热点，肿瘤领域对微小RNA-21的相关研究较多，大量的研究结果，都证实在多种恶性肿瘤中，都可检测到微小RNA-21表达异常，微小RNA-21表达异常可能与癌症的发生、进展有着某种联系，其在癌细胞的转移、浸润、凋亡中发挥着调控作用[7]。目前，心血管领域也研究证实，心肌梗死胶原重构、血管平滑肌增殖、心肌细胞肥厚等均与微小RNA-21表达有关。据相关研究显示，微小RNA-21在正常人体中，会随着年龄的增长而降低，在婴儿、未成年人的心肌细胞中，检测的微小RNA-21表达要明显比成年人更高[8-9]。在本次研究中，两组患者的年龄比较差异无统计