独一味颗粒抗大鼠肝纤维化的实验研究-中医内科学专业论文.docxVIP

缩略词表 ALT 丙氨酸氨基转移酶 AKP 碱性磷酸酶 AST 天门冬氨酸转氨酶 BMI 身体质量指数 COL 秋水仙碱 ECM 细胞外基质 HA 透明质酸 HAI 肝组织炎症活动度计分 HSC 肝星状细胞 HYP 羟脯氨酸 LN 层粘蛋白 MAO 单胺氧化酶 NS 生理盐水 PCⅢ Ⅲ型前胶原 TP 总蛋白 申明 本人承诺：硕士学位论文《独一味颗粒抗大鼠肝纤维化 的实验研究》是本人在成都中医药大学攻读硕士学位期间在导师 指导下独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。该论文 著作权及涉及的有关知识产权归成都中医药大学所有，有关该学位论 文成果的开发、转让、论文发表等，均需征得导师和成都中医药大学 同意。 本人同意：成都中医药大学有权通过影印、复印等手段汇编学位 论文予以保存，并提供查阅和借阅；有权按照规定向国家有关部门、 机构送交论文及电子版，公布（或刊登）论文内容。 硕士生签名： 导 师 签 名： 年 月 日 引 言 肝纤维化已成为一个危害人类生命健康 的世界性问题 ，如果能阻 止其发生， 肝硬化及其并发症就能得到 有效控制。 美国肝病学会第 3 次肝纤维化专题会议的召开 ，预示着 “创伤愈合整合反应 ”新时代的 出 现 。肝纤维化的可逆性早已被大家认可 ，现在有部分学者发现有些 肝 硬化一样是可以被逆转的 ［ 1 ］。肝纤维化的形成与发展是极其复杂的 过程 ，其 病理生物学改变主要 表现为肝内及其间质的生态平衡失调 与 介质及细胞外基 质（ extracellular matrix , ECM ）的 代谢异常 。它不仅 是向肝硬化发展的必由之路 ，而 且贯穿于肝硬化的全过程 ，是近年 来 研究的热点 ［ 2- 4 ］。 现代药理学研究表明藏药独一味具有镇 痛消肿 、活血化瘀 、续筋 接骨等传统功能 ，而且它扶正固本 、保肝护肝的作用近年来也得到 了 广泛地证实 。故我们假想 ，是 否可以应用独一味良好的活血化瘀及 保 肝作用，进一步探讨其对肝纤维化的影响。 本实验我们选用不同剂量的独一味颗粒 ，针对肝损伤模型 ，通过 观察模型大鼠血清肝纤指标含量的改变 及其对肝脏病理学的影响 ，来 解释独一味防治肝纤维化的作用机理 ，从而联合或部分替代抗肝纤 维 化首选药 γ－干扰素， 减轻因服用此类药物而产生的不良反应， 更好 地造福于肝损害患者。 独一味颗粒抗大鼠肝纤维化的实验研究 1 实验材料 1.1 实验动物 SD 大鼠， 60 只， 体重 （ 160±20 ） g， 雌 雄各半， 由成都中医药大 学动物实验中心提供，合格证号： SCXK2004-11。 1.2 实验药品及试剂 1. 2. 1 实验药品 ①独一味颗 粒（规格 ：3 g/袋 ，四川川大华西药业股份有限公司生产， 批号： 090102） ②秋水仙碱（规格： 0.5 mg/片，云南植物药业有限公司生产，批号： 1. 2. 2 实验试剂 ①四氯化碳 （ CCl4 ）分 析 纯 AR（规格： 500 ml/瓶， 成都科龙化工 试剂厂生产，批号： ②透明质酸（ HA ）、Ⅲ型前胶原氨基端肽（ PⅢ NP ）放射免疫分 析试剂盒（北京北方生物技术研究所提供，批号： 090808、 090720） ③丙氨酸氨基转移酶 （ ALT） 、 天冬氨酸转氨酶 （ AST）、单 胺 氧 化酶（ MAO ）试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司提供，批号 ： 090251、 090271、 090291）。 1. 3 主要仪器 ① GC-1200γ 放射免疫计数器（中国科大中佳公司） ② 7170A 全自动生化仪（日本日立公司） ③ LEICA DM4000B 显微图像分析仪。 1. 4 实验场所及饲养 1. 4. 1 实验场所 成都中医药大学时间医学实验室。 1. 4. 2 动物饲养 正常对照组每天自由进 水（清洁自来水 ）及进食颗粒饲 料（由成 都中医药大学动物实验中心提供 ）。模型组及各给药组采用高 脂（ 90% 玉米粉 +1%胆固醇 +7%猪油 +2%蛋黄粉）饲料（胆固醇由成都精诚生 化制品有限公司提供，玉米粉、猪油、蛋黄粉均为市售）喂养、饮用 清洁自来水。实验动物饲养观察室的温度、照明、噪音、换气等条件 均控制在规定范围内（室温保持 18~22°c ，通风良好，相对湿度 60~80%，12h 小时光照维持，昼夜循环），每天定时清洁动物房，更 换大鼠饮用水及添加饲料 ，隔天更换实验鼠用笼具 。以 上 动物及实验 使用条件均符合国家科委技术委员会制订 的《实验动物管理条例 》。 2 实验方法 2. 1 动物分组 SD 大鼠 60 只，于实验室适应性喂养 7d 后，随机分成