蚕蛹虫草中虫草素与腺苷含量影响因素研究.docVIP

蚕蛹虫草中虫草素与腺苷含量影响因素研究 　　摘要： 以双蒸水为溶剂，用反相高效液相色谱-紫外检测法测定蚕蛹虫草样品中虫草素和腺苷含量，并用该方法测定了19-3、17-3、MS、1-1以及1-Y等12种不同虫草菌株栽培的蚕蛹虫草、不同品质的蚕蛹虫草以及蚕蛹虫草不同组织中的虫草素和腺苷的含量。结果表明：1-Y菌株的虫草素和腺苷含量均最高，质量分数达15.45 mg/g和4.40 mg/g；不同品质的蚕蛹虫草中虫草素则以感染而未出草的僵蚕最高；蚕蛹虫草的僵蚕体对虫草素的富集能力高于子座，蚕蛹虫草的子座对腺苷的富集能力高于僵蚕体。该结果可对探求高虫草素含量和高腺苷含量的虫草材料提供理论依据。 　　关键词：虫草素；腺苷；含量；影响因素；高效液相色谱 　　中图分类号：S886.9 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2015）01-0109-03 　　Abstract The contents of cordycepin and adenosine in Cordyceps militaris samples of different qualities， different parts and inoculated with 12 different strains such as 19-3， 17-3， MS， 1-1 and 1-Y were determined by RP-HPLC using double distilled water as solvent. The results indicated that the contents of cordycepin and adenosine in 1-Y were both the highest， and the mass fraction reached 15.45 mg/g and 4.40 mg/g respectively. In Cordyceps militaris of different qualities， the content of cordycepin in silkworm infected but no fruiting were the highest. The enrichment ability of silkworm body to cordycepin was higher than stroma， while that of stroma to adenosine was higher than silkworm body. These results provided theoretical basis for seeking Cordyceps militaris with high cordycepin and adenosine contents. 　　Key words Cordycepin； Adenosine； Content； Influence factors； RP-HPLC 　　蚕蛹虫草（Cordyceps militaris），即以家蚕幼虫为寄主栽培的蛹虫草，其虫草形态更接近天然虫草[1]，其所特有虫草素具有抗肿瘤、抗病毒等方面的作用而引起医学界的高度重视。腺苷在抗病毒，抗菌，预防治疗脑血栓、脑溢血，抑制血小板积聚，防止血栓形成，消除面斑和抗衰防皱等方面效果较佳[2]。 　　由于虫草中虫草素和腺苷含量均偏低，因此快速、准确检测虫草中虫草素和腺苷含量，对蚕蛹虫草品质鉴定至关重要，而提供高虫草素和腺苷含量的蚕蛹虫草材料对于蚕蛹虫草的提纯、深加工等开发、利用具有举足轻重的作用，但是相关报道较少。为此，笔者建立了反相高效液相色谱法，利用19-3、17-3、MS、1-1以及1-Y等12种不同蛹虫草菌株栽培蚕蛹虫草，快速测定虫草素和腺苷含量，以探求高虫草素和腺苷含量的虫草材料。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料及主要试剂和仪器 　　菌株：1-Y、DL-4 、MS、DL-5、DL-2、DL-6、19-3、DL-1，用于测定不同菌株对蚕蛹虫草中虫草素和腺苷含量的影响； JL-3、 JL-9，用于测定同一菌株接种后出草的虫草和不出草蚕体虫草素及腺苷含量比较；MS、19-3、1-Y、17-3和1-1，用于测定虫草不同部位中虫草素和腺苷的含量。 　　材料：本研究室培育的蚕蛹虫草样品，栽培方法见文献[3～5]，经80℃烘干，粉碎，过80目筛后，-20℃冷冻保存待测。 　　试剂：虫草素标样（SIGMA），腺苷（常州大康）；四氢呋喃（色谱纯），甲醇（色谱纯）；KH2PO4、K2HPO4、乙醇均为分析纯，试验用水为自制双蒸水。 　　仪器：高效液相色谱仪（大连依利特）配UV200紫外-可变波长检测器