超声波辅助法提取桔子水溶性多糖的工艺优化.docVIP

超声波辅助法提取桔子水溶性多糖的工艺优化 　　摘要 桔子食用方便，富含多种营养，为提高其综合利用价值，本研究以桔子果实为原料，利用超声波提取法做单因素试验，然后结合正交试验，探索液料比、超声时间和超声温度对桔子水溶性多糖提取率的影响，以期得到桔子水溶性多糖的最佳提取工艺。结果表明：桔子水溶性多糖的最佳提取条件为液料比3∶1，超声提取60 min，提取温度50 ℃，此条件下桔子水溶性多糖提取率可达17.376%。本提取工艺条件将对实际生产中桔子水溶性多糖的分离提取提供借鉴。 　　关键词 桔子；水溶性多糖；正交试验；工艺优化 　　中图分类号 TS20 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）21-0256-02 　　桔子是芸香科柑橘属的一种水果，味道酸甜不一，在我国有广泛的栽培，其果实富含多糖、蛋白质和多种维生素[1]。多糖类化合物是桔子中一类重要活性成分，具有抑菌、降低血糖、抑制肿瘤生长、调节机体免疫等多种功能[2-4]。目前对桔子药用方面的研究较多的是其桔皮[5-6]，对其果实的研究主要集中在桔子果醋及桔汁酿酒方面[7-9]，对桔子果实多糖的提取及抑菌方面的研究鲜见报道。本试验对桔子果实水溶性多糖的超声波提取工艺进行优化，以期为桔子果实的综合利用提供理论基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　桔子采购自山西省太原市蔬菜市场，普通食用级，金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）（ATCC25923）、大肠杆菌（Escherichia Coli）（ATCC 25322）均购买自中国微生物菌种网。多糖标准品蔗糖购自国家标准物质网，其他试剂均为普通分析纯。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 桔子水溶性多糖提取方法。挑取无病虫害、新鲜可食的桔子果实清洗干净后去皮，称取一定量果肉后，破碎打浆，用研钵磨细后置于锥形瓶中，加入一定比例的水作提取剂，在特定温度下，超声波功率为100 W条件下超声提取一定时间后冷却，加入1倍体积的95%乙醇，静置15 min，8 000 r/min离心15 min，取上清液，即得桔子果实水溶性多糖提取液。 　　1.2.2 桔子水溶性多糖含量的测定。采用蒽酮硫酸法测定桔子果实多糖含量[10]，其原理是在浓硫酸的作用下，糖可生成糠醛或羟甲基糠醛，接着再与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，它在可见光区的吸收峰为630 nm，故在765 nm下用紫外可见分光光度计测定其吸光度；用蔗糖作标准品，绘制标准曲线，计算多糖质量。多糖得率的计算公式如下： 　　多糖得率（%）=（m2/m1）×100 　　式中，m1为桔子原料质量，m2为提取所得多糖质量。 　　1.2.3 超声波法辅助法提取桔子水溶性多糖条件的优化。①单因素?验。在查阅多糖提取文献和桔子多糖提取预试验的基础上，固定液料比（v/m）为3∶1，超声温度为50 ℃下提取40 min的条件下，分别将液料比定为1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1和6∶1，超声提取时间定为30、40、50、60、70、80 min，提取温度定为40、50、60、70、80、90 ℃，分别进行单因素试验，分析各因素不同水平对桔子多糖提取量的影响。②正交试验。在单因素试验的基础上，确定上述3个因素的上、下临界限，各因素分别选择3个水平进行正交试验，确定最佳提取工艺，试验设置如表1所示。 　　1.3 统计分析 　　所有试验均做3次重复，并采用Excel和 DPS 软件对数据进行分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同因素对桔子水溶性多糖提取率的影响 　　2.1.1 液料比对桔子水溶性多糖提取率的影响。在不同液料比（mL/g）条件下，设定超声波功率100 W、温度为50 ℃、超声波提取40 min后，测定桔子水溶性多糖含量，结果如图1a所示，液料比对桔子果实提取液中水溶性多糖的含量有较明显的影响。随着液料比的逐渐增大，桔子水溶性多糖的含量也逐渐增加，当液料比达3∶1时多糖含量达到最大值，且增长百分比也达最大值9.5%（相比液料比为2∶1时）；此后，再增大液料比，水溶性多糖含量逐渐减小，在液料比为5∶1时，降低百分比达最大值，比液料比为4∶1时降低5.7%。桔子水溶性多糖含量随着液料比先增大后减小的趋势可能是由于在较小的液料比条件下，原料桔子与提取剂水不能充分接触，随着液料比的增加它们之间的接触面逐渐扩大，水溶性多糖才能更加充分扩散到溶剂中；但当液料比继续增大，就会导致原料过分分散，导致超声波的超声提取作用相对减弱，多糖溶出量就会下降，而且过多的提取剂会使后续提取手续增多[4]，故正交试验液料比的筛选范围应选择2∶1、3∶1和4∶1。 　　2.1.2 提取时间对桔子水溶性多糖提取率的影响。不同的超声波提取时间对