有机酸发酵课件.ppt

第七章 有机酸发酵;具有广泛用途的有机酸。世界乳酸的总产量约为20万吨左右，日本和美国两国的乳酸需求量3.5万吨。我国的乳酸目前已形成了约4万吨的生产能力。 青岛扶桑化学公司是国内最大的精制(发酵)乳酸出口企业。 PLA为一种无毒高分子新材料，在环境中可自动降解，可用于生产医用塑料制品和食品包装等。产业界认定为新世纪最有发展前途的新型材料。由于我国原料玉米丰富，发展乳酸及聚乳酸产业的前景广阔。目前，乳酸生产成本偏高以及聚乳酸聚合难题成为制约乳酸工业发展的瓶颈。 发酵法生产的乳酸有L－乳酸和D－乳酸。我国用德氏杆菌厌氧发酵生产的乳酸96％为D型，L型只有4％。化学合成法生产的乳酸D型和L型个50％。称DL乳酸。;苹果酸在饮料中使用较多。但由于价格较贵，故苹果酸的用途受到了一定的限制。全球苹果酸的年产销量约在3万吨左右。苹果酸有清除牙齿色斑和牙垢(牙石)的美容作用。故日本花王等日化产品厂商均已在牙膏、牙粉等洁齿产品中添加苹果酸。而L苹果酸可用于医药工业的输液、pH调节剂和某些药物的中间体。每吨纯品65－70万元人民币。生产成本高,出口数量少。我国采用固定化菌体将富马酸转化为L苹果酸，因技术不过关，富马酸残留高，出口困难。而发酵法生产L－苹果酸仍处于研究阶段。; 葡糖酸是惟一具有促进双歧杆菌等“益生菌”生长作用的有机酸。蜂蜜、酿造醋等产品均含有一定量的天然葡糖酸。酸味为柠檬酸的1/3。葡糖酸作为食品和医药原料(如用于生产“葡糖酸钙)的用量正在逐年上升。全球葡糖酸的产销量约在2万吨左右，其中90%用于食品加工(如作为豆腐凝固剂)，用于医药的仅占1成。主要产品葡萄糖酸、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸δ－内酯。; 主要来源是葡萄酒生产厂。酒石酸在食品工业中应用远远不如柠檬酸那样广泛，但它却是医药工业的重要原料。许多难溶药物均可加工成为水溶性极佳的酒石酸盐(如经典药物“酒石酸锑钾”)。欧洲各大葡萄酒厂是世界最大的酒石酸生产基地，全球80%的酒石酸产自欧洲 。发酵法生产酒石酸仍在研究中。; 重要的化工原料，主要用于晴纶化纤、树脂、橡胶、涂料、造纸、制药、农药、轻工、食品等领域。世界年需衣康酸5－6万吨。主要生产国美国、日本、俄罗斯。我国以发酵法生产衣康酸，年产量5000t。大部分内销。因技术存在问题，产品质量不过关。外销困难。;第二节 柠檬酸的发酵机制及代谢调控;一、柠檬酸的生物合成途径;葡萄糖经EMP、HMP途径降解生成丙酮酸，丙酮酸一方面氧化脱羧生成乙酰CoA，另一方面经CO2固定化生成草酰乙酸，草酰乙酸与乙酰CoA缩合生成柠檬酸。 柠檬酸生产菌（黑曲霉）存在TCA和乙醛酸循环。以糖质原理发酵时，当柠檬酸积累时， TCA和乙醛酸循环被阻断或减弱。 柠檬酸生成并积累条件下，提供草酰乙酸的途径： ;二、黑曲霉柠檬酸发酵代谢调控;＋ 激活 － 抑制;1—磷酸果糖激酶 2—丙酮酸脱氢酶 3—柠檬酸合成酶 4—乌头酸水合酶 5—异柠檬酸脱氢酶 6—?-酮戊二酸脱氢酶 7—琥珀酸脱氢酶 8—富马酸酶 9—苹果酸脱氢酶 10—草酰乙酸水解酶;磷酸果糖激酶（PFK）调节：柠檬酸和ATP抑制该酶活性，为AMP、Pi、NH4+所激活、菌体内较高浓度NH4+能有效解除柠檬酸和ATP对PFK抑制。 丙酮酸羧化酶：催化经CO2固定反应生成草酰乙酸，此酶几乎不受代谢产物的调节。;柠檬酸合成酶：此酶不参加调节作用，草酰乙酸的浓度可提高其对乙酰CoA的亲和力。 顺乌头酸水合酶、异柠檬酸脱氢酶：该酶的丧失或失活是阻断TCA循环，大量生成柠檬酸的必要条件。柠檬酸产生菌体内该酶的活性本身就要求很弱，控制培养基中的Fe2+ 的浓度和pH2.0，酶失活，但不能够低于0.1mg/L。（柠檬酸积累正是在这个条件下） α-酮戊二酸脱氢酶：受高葡萄糖和铵离子的阻遏。因此当以葡萄糖为碳源时，在柠檬酸合成期，菌体内不存在?-酮戊二酸脱氢酶或活力很低。;培养基中Mn+ 缺乏会使NH4+浓度升高。（影响菌体蛋白合成及外源蛋白的分解利用） 当缺乏锰时，HMP和TCA循环水平低，生长期菌丝的蛋白、核酸和脂肪含量明显减少，而氨基酸和铵离子水平升高（解除柠檬酸和ATP对PFK酶的抑制），丙酮酸和草酰乙酸水平升高，柠檬酸大量积累。;黑曲霉中除具有一条标准呼吸链以外，还有一条侧系呼吸链。标准呼吸链氧化时产生ATP，反馈抑制PFK酶，侧系呼吸链不产生ATP。缺氧时，侧系呼吸链失活，导致柠檬酸产量急剧下降。因此，在柠檬酸发酵过程中，特别是产酸期，一定要充足氧的供应，保证更多的NADH2通过侧性呼吸链将H2交给O2生成CO2和H2O，使呼吸产生的ATP减少，解除ATP对PFK酶的反馈抑制，使EMP途径代谢流增大，丙酮酸和草酰乙酸生成水平提高，柠檬酸产率提高。; 积累柠檬酸的必要条件;⑴严