HiFi石蜡包埋组织microRNA快速提取试剂盒.PDFVIP

◆ HiFi 石蜡包埋组织microRNA 快速提取试剂盒 ◆ 目录号 1131 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 HiFi 石蜡包埋组织microRNA 快速提取试剂盒 目录号：1131  适用范围： 适用于快速从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取RNA包括microRNA，RNA 可直接用于反转录PCR，荧光定量PCR. 。  试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 50 次(113101) 裂解液PKD 室温 15 ml 结合液RBC 室温 25 ml 10ml 漂洗液RW 室温 第一次使用前按说明加指定量乙醇 蛋白酶K 粉 （可选）40mg/ml -20℃ 20mg RNase-free H O 室温 10 ml 2 基因组 DNA 清除柱和 室温 50 套 收集管 RNA 吸附柱 RA 和收 室温 50 套 集管 本试剂盒在室温储存9 个月不影响使用效果。 - 1 - 储存事项： 1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直 接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此 运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 3. 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K 为冻干粉状，收到后，可短暂离心后， 加入0.5 毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按 照每次使用量)分装冻存，－20℃保存。 4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及 时盖紧盖子。  产品介绍： 本试剂盒设计用于快速从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取RNA包括 microRNA 。独特的裂解液/蛋白酶K迅速裂解细胞释放出RNA，然后裂解混合物通过一 个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结 合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快 速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐 的RNase free H 0将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。得到的RNA可用于反转录PCR、荧光 2 定量PCR等实验。  产品特点： 1. 完全不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 2. 快速，简捷，单个样品RNA 提取操作一般可在 1 小时内完成。 3. 试剂盒的独家基因组清除柱和配方确保有效清除基因组 DNA 残留，一般情况下 得到的RNA 不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR 等实验。 4. 多次柱漂洗确保RNA 高纯度，可直接用于下游各种实验。 - 2 -  注意事项： 1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机， 如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 样品处理量绝对不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱RA处理能力，否则造 成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾 脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超 6 过3x10 细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品 DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如不超过2个10μm厚度石蜡切片。 将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。 3. 裂解液PKD、结合液RBC 中含有刺激性化合