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五味子木脂素和生态因子相关性研究 　　[摘要]建立五味子中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素4种成分的高效液相色谱测定方法，分析不同样地间气候因子和海拔高度对五味子木脂素类含量的影响，确定吉林省五味子最适栽培地区的气候特点。采用高效液相色谱法，Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相甲醇（A）-水（B）梯度洗脱，检测波长254 nm，柱温 35 ℃，流速1 mL?min-1，该测定方法重复性、稳定性和精密度均良好。并用SPSS软件分析气候因子和木脂素相关性，结果发现采集于吉林省集安市、柳河县、安图县和抚松县的五味子成熟果实中五味子醇甲质量分数均高于0.4%，达到质量要求，但是，五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量与样地海拔高度间呈明显的线性负相关关系，即随海拔高度增加呈下降趋势，特别是五味子醇甲的负线性拟合系数达到0.844 1，具有显著性，而五味子丙素与样地海拔高度的相关性不明显。与五味子木脂素中五味子醇甲、五味子乙素以及4种木脂素含量呈显著正相关的气候因子主要是温度因子（年均气温、7月最高温、7月平均温、1月最低温、1月平均温）和降水因子（年均降水量），说明较高的温度和降水量有助于五味子中木脂素的形成和累积。建议五味子栽培区域应尽可能选择在温暖多雨的低海拔地区。 　　[关键词]五味子；木脂素；高效液相色谱；含量测定；气候因子；相关性分析；最适栽培区域 　　[收稿日期]2013-10-17 　　[基金项目]吉林省医药产业发展重大专项（YYZX201007）；科技成果转化计划项目（20130305049YY） 　　[通信作者]杨利民，Tel：（0431E-mail：ylmh777@126.com 　　[作者简介]林红梅，硕士，讲师，主要从事药用植物资源生态方面研究，TelE-mail： baolinhm@126.com五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis （Turcz.）Baill的干燥成熟果实，主产于吉林、辽宁、黑龙江等地，习称“北五味子”，因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味俱全而得名。是我国长期使用的补益类药物，应用历史已有2 000多年。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心之功效[1-3]。 　　大量研究证明，五味子中含有的联苯环辛二烯结构的木脂素类物质是其主要的生物活性成分[4-12]，主要包括五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素等，此类物质具有保肝、降酶、保护中枢神经系统、抗艾滋病毒和抗癌等多种活性[13-15]。在2010年版《中国药典》中， 以五味子醇甲作为五味子药材的质量控制指标， 其质量分数要求达到0.4%[1]。 　　中国东北是五味子的道地产区，目前有大面积栽培，虽然对栽培药材质量与生态环境关系的研究不少[16-18]，但针对五味子的报道却很少[19]。本研究采用HPLC，对来自吉林省4个产地的五味子样品中4种木脂素类物质（五味子醇甲，五味子甲素，五味子乙素，五味子丙素）进行含量测定，并分析不同产地间生态环境对五味子木脂素类物质含量的影响，为五味子的优质规范化栽培提供依据。 　　1材料 　　五味子样品于2010年9月果实成熟期采于吉林省集安市、柳河县、安图县和抚松县，样地选择尽量随机，如集安市样区尽管有2个样地海拔几乎相同，但实际两样地经纬度相差很远，故设置为2个点。集安市样区地处长白山脉中南段，在气候区划中属“潮湿森林气候带岭南暖温气候类型”； 抚松县样区地处长白山西北麓，在气候区划中属“潮湿森林气候带温和气候类型”；柳河县样区地处长白山脉西部，在气候区划中属“湿润森林气候带温暖气候类型”；安图县样区地处长白山北麓，在气候区划中属“湿润森林气候带温寒气候类型”[20]，样品采集点见图1。 　　五味子醇甲、五味子甲素对照品（批号分别为110857-200709，110764-201010）均购于中国食品药品检定研究院，纯度分别为97.3%，98.0%；五味子 　　图1五味子样品采集点位置图 　　Fig.1Location map of Schisandra chinensis sample 　　乙素、五味子丙素对照品（201006，201011） 购于四川省维克奇生物科技有限公司，纯度均≥98.0%。甲醇（色谱纯）美国Fisher公司，实验用水为高纯水，试剂均为分析纯。 　　Agilent 1100高效液相色谱仪（在线脱气机、四元泵、DAD检测器、手动进样器、HPChem station化学工作站），6202高速粉碎机（台湾原鑫田欣镇企业有限公司），PL203电子天平[0.001 g，梅特勒-托利多国际贸易（上海）有限公司]， DL-820E智