磷脂酶C―ε1基因单核苷酸多态性及基因表达和胃癌发病风险相关性探讨.docVIP

磷脂酶C―ε1基因单核苷酸多态性及基因表达和胃癌发病风险相关性探讨 　　【摘要】 目的 探究磷脂酶C-ε1（PLCE1）基因单核苷酸多态性及基因表达和胃癌发病风险相关性。方法 选取300例胃癌患者及同期300例正常人群， 对其DNA进行提取以及测定。结果 经研究结果表明其PLCE1基因和胃癌存在一定的易感性相关。结论 经研究PLCE1基因单核苷酸多态性及基因表达与胃癌发病具有一定的相关性， 并为胃癌以及相关组织来源肿瘤的预警起到了一定的作用。 　　【关键词】 磷脂酶C-ε1；单核苷酸多态性；基因表达；胃癌 　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.30.015 　　就目前而言， 我国胃癌的发病率逐年呈上升趋势， 其发生会给我国人民带来一定的负担， 对胃癌防治的主要方法则是及早诊断、及早治疗、及早预防， 因此需要找到可以适用于临床的肿瘤标志物[1]。本次研究对本院2005年2月～ 2015年3月收治的300例胃癌患者的临床资料进行分析， 现报告如下。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料 选取本院2005年2月～2015年3月收治的300例胃癌患者， 将其设为观察组， 所有患者经诊断后均为胃癌；选择同期300例正常人群， 将其设为对照组。观察组中男192例， 女108例， 年龄42～68岁， 平均年龄（52.7±6.7）岁；对照组中男188例， 女112例， 年龄43～69岁， 平均年龄（53.2±7.8）岁。所有研究对象均签署了知情同意书。两组研究对象的一般资料比较， 差异无统计学意义（P0.05）， 具有可比性。 　　1. 2 方法 选用罗氏480PGR仪对受试者的DNA进行提取， 震荡混匀装有血液的冻存管， 时间为10 s， 随后将其转入到离心管中， 并向离心管中增加CL， 在对其震荡20 s之后将上清液舍去。并向离心管中加入CL（5 ml）， 并用振荡器将其充分混匀， 使其能够溶解， 并将上清液进行舍去， 并将离心管倒扣放置在吸水纸处。 　　制备FG：蛋白酶K工作液， 使其在低温下进行工作。同时向每个样本离心管中加入2.5 ml FGPK工作液， 随后选用涡旋振荡器将其均匀混合。在65℃恒温进行30 min水浴， 使得蛋白酶能够发挥自身的作用。随后对核算进行相应的沉淀工作， 在对其进行沉淀的过程中应先用手指进行敲打， 随后进行5 s震荡， 并将上清液进行舍去， 并将离心管倒扣放置在吸水纸处。选用空气干燥DNA沉淀， 时间为5 min。当核酸沉淀完成后， 选择65℃水浴将DNA进行溶解， 时间为60 min， 从而完成核酸溶解。并通过分光光度计对DNA进行定量提取。 　　1. 3 选取SNP位点 选择Y、C2以及RA结构域， 按照HapMap 数据库所提供的SNP位点基因型频率分布， 将最小等位基因频率以及0.05的位点进行删除后， 获取了7个候选标签SNP（tSNP）位点， 位于Y结构域的则是rs3765524、rs3818432 ， 位于C2结构域的是rs2274223、r， 位于RA结构域的则是rrs3781264、 r 　　1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 统计两组间频数 经研究后， 其SNP片段呈现增大趋势， 并选用飞行时间质谱生物芯片系统对其SNP位点进行检查， 具有较高的检测成功率。利用HWE对SNP位点进行检查后能够看出， 其SNP位点的分布具有一定随机性， 因此遵循了遗传学定律， 两组比较差异无统计学意义（P0.05）， 从而证实了分析结果较为准确。对比两组患者的r点基因分布， 差异具有统计学意义（P0.05）， 且两组间rs3765524、rs3818432位点基因分布差异有统计学意义（P0.05）， 由此说明PLCE1基因和胃癌存在一定的易感性相关。 　　2. 2 分析单个SNP位点遗传模型 选取基因型、显性以及等位基因三种模型， 从而创建模型并对其进行分析。在基因模型中， 其rs3765524、rs2274223、r所存在相关的杂合基因和胃癌发病风险存在一定的相关性。而经过显性模型检测后， 均确定了上述三个位点和胃癌所具有的关联性。而经过等位基因模型分析后， 其rs3765524 中的T等位基因以及r中的G等位基因和胃癌发病存在一定的风险关系。除此之外， 其rs3818432中的CA 基因型也可能和胃癌发病存在一定的关系。但上述