藏药唐古特青兰提取物在大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO)中的神经保护修复作用生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

I I 摘要 摘要 藏药唐古特青兰，也名甘青青兰，常用于治疗多种疾病，同时有研究证明该 药物在小鼠中的抗缺氧作用。植化分析显示，唐古特青兰的主要化学成分是三萜 类和黄酮类化合物，而且其黄酮类化合物含量高于其他多种传统中药。本研究的 总黄酮检测实验显示，唐古特青兰的全草﹑粗提取物及正丁醇部分的总黄酮含量 分别为 8%﹑15%和 52%，而氯仿及水提取部分的含量仅为 6%。 本研究通过体内实验检测唐古特青兰提取物（DME，总黄酮含量为 52%）在 大鼠脑永久缺血模型中的抗氧化作用及可能的神经保护或神经修复作用。RT-PCR 及 Western blot 实验显示：通过灌胃的方法，唐古特青兰提取物（30 mg/kg/天，7 天）能够调节脑源性神经营养因子（BDNF）和神经营养素 3（NT-3）的 mRNA 表 达和蛋白质合成。DME 能够有效刺激假手术组和手术组大鼠同侧额叶的 BDNF mRNA 表达和蛋白质合成，同时也刺激手术组大鼠的海马区的 BDNF 水平增加。 在假手术组中，尽管 DME 对 NT-3 的 mRNA 和蛋白质的表达没有作用，但是 DME 却能够显著增加手术组中大鼠的同侧额叶和海马区的 NT-3 mRNA 的表达和蛋白 质的合成。另一方面，DME 能够降低假手术组和手术组中大鼠海马区的丙二醛 （MDA）含量；在手术组大鼠的同侧额叶和海马区，DME 能够显著减少降低的内 源性抗氧化物（超氧化物歧化酶 SOD，谷胱甘肽过氧化物酶 GPx 和过氧化氢酶 CAT）的活性。这些发现提示，DME 可能通过对脑缺血的抗氧化作用及刺激神经 营养因子的合成，对脑缺血诱导的脑损伤有治疗作用。 关键词：唐古特青兰，永久性脑缺血，黄酮类化合物，抗氧化，神经营养因子表 达 II II ABSTRACT ABSTRACT Dracocephalum tanguticum Maxim (D. tangutium), also named Tangguteqinglan or Ganqingqinglan in Chinese, is a Tibetan herbal medicine which is used in the treatment of many diseases while is proved to be effective in anti-hypoxia in mice. Phytochemical analysis of D. tangutium showed that main chemical components are triterpene and flavonoids and notably D. tangutium contains more flavonoids than that of many traditional Chinese herbs. Total flavonoid assay showed that whole herb, crude extracts and BuOH-soluble fraction (DME) contained 8%, 15% and 52% flavonoids, respectively, whereas there were only 6% flavonoids in both CHCl3- and H2O- soluble fractions. In the present study, the potential antioxidant activities and neuroprotective or neurorestorative action of D. tangutium extract (DME), which contained 52% of total flavonoids, on cerebral ischemia injury in rats were assessed by in vivo experiments. RT-PCR and Western blot analysis showed that the extract (30 mg/kg/day for seven days) by intragastric administration modulated the mRNA expression and protein synthesis of two neurotrophic factors: brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and neurotrophin 3 (NT-3). DME was effective to stimulate BDNF mRNA express