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桉树组织培养技术的研究综述
桉树组织培养技术的研究综述
摘要在全球生态系统遭到严重破坏,木材消耗日益紧张的今天,占世界人工林面积1/3的桉树,其快繁技术研究是十分迫切和必要的。该文综合了一些与桉树组织培养技术研究相关的文献及杂志,对桉树的组织培养技术进行概况性的介绍,以供林业工作者参考。
关键词桉树;组织培养;遗传力
中图分类号 S792.390.4 文献标识码A文章编号 1007-5739(2011)10-0192-01
桉树是桃金娘科桉树属植物,自然分布于大洋洲,多数为世界著名的硬木资源,全世界桉树人工林面积达600万hm2以上,约占世界人工林总面积的1/3,年产木材6 000万m3以上。我国引种桉树始于1890年,目前有600多个县市种植桉树人工林,面积约为50万hm2。桉树主要集中在南亚热带地区,浙江省乐清市是我国桉树北部分布的临界点。作为发展中的木材消耗大国,桉树组织培养技术具有重要的研究意义。
1组织培养技术
1.1材料的选择
作为快速繁殖的手段,组织培养成败的关键在于材料的选择。除非通过原生质融合、愈伤组织突变、细胞杂交变异,否则组培不可能改变植物的遗传特性。通过优树利用提高增产效益是组织培养的目的,优树幼化的器官基因型相同,通过快速繁殖,可成为遗传稳定的庞大群体。一般通过以下几种方式获取优树幼化的器官,以用作组培的材料。
1.1.1杂交育种与快速繁殖相结合。这是无性系育种的中心环节,是优化营林措施的龙头。许多杂交组合起初都是从自然杂交中发现的,后来通过人工正反杂交,证实其为杂交种,如雷林1号桉、蓝大桉、柳窿桉等杂交组合。通过正反交创新产生的F1代种子或扦插苗造林,增产效果显著。F1代种子产量不多,能够提供的器官较少,为满足生产发展的需要,可用扦插、组织培养等方法快速繁殖,不断优化无性系造林,提高林分产量。广西东门林场已掌握主要桉树种的物候,获得了50余个最佳组合种,正进行扦插育苗,供组织培养试验。
1.1.2最佳杂交组合F1代的种子或器官。其遗传了父母本的优良性状,具有杂交优势。取其器官,能够稳定其遗传性状;造林后林相整齐,生长迅速[1]。
1.1.3建采穗圃,使采穗幼化。由于优质母树数量很少,虽然可以用其树冠上部的嫩枝扦插,进行无性繁殖,但生根率不高,频率较低,所以可通过建立采穗圃使采穗幼化,用于无性繁殖。实践证明,用树蔸部的半木质化萌芽条,其发根率最高,成活量最多。通过采树冠上部嫩枝,埋入土中促其萌芽,或在优树蔸部环状剥皮,促其萌芽,取嫩芽进行组培,以芽繁芽。幼化的器官,既具有适应环境的可塑性,又具有稳定的遗传性状,用于无性繁殖的成功率较高[2]。
1.2培养基
植物组织培养的培养基一般分为2种:固体培养基(加琼脂)和液体培养基(不加琼脂)。一般都包括大量元素、微量元素和碳水化合物,并添加维生素、氨基酸、生长素、细胞分裂素等附加物。适合于诱发愈伤组织的培养基,不一定适合于维持这些愈伤组织;适合于液体培养的培养基不一定适合于固体培养,要获得最佳的生长发育条件,须认真筛选培养基。B5、H、改良H等基本培养基可用于桉树胚状体的诱导;B5、怀特(White)、N6、H、MS等基本培养基用于不定芽的诱导[3]。
培养基中的大量元素,除碳、氧、氢外,还有硝态氮或铵态氮、磷酸盐、硫酸盐、钾,还有少量的钠、钙、镁及各种微量元素,细胞分裂、分化与微量元素的关系研究较少。为了保证铁离子的供应,通常先将FeSO4?7H2O 7.8 mg+Na2-EDTA 37.3 mg混合,然后加入到1 L的培养基中[4]。
植物激素是细胞萌动和分化的关键物质,是培养基不可缺少的组成部分。诱导桉树不定芽的附加成分主要有1AA(吲哚乙酸)0.5~2.0 mg/L、NAA(萘乙酸)0.01~2.00 mg/L、1BA(吲哚丁酸)0.1~1.0 mg/L、2,4-D(二氯苯氧乙酸)0.5~2.0 mg/L、KT(激动素)0.8~1.0 mg/L、BA(6-苯基嘌呤)0.5~2.0 mg/L、CM(揶乳)10%等。桉树胚状体诱导常用的附加成分:用于愈伤组织诱导的为2,4-D 2 mg/L、(KT)0.8~1.0 mg/L;用于胚状体分化诱导的为BA 0.2~1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L(或IBA 0.5~1.0 mg/L)。配置培养基后,pH值调至5.8~6.5,分瓶加塞包扎,经1.0~1.5 kg/cm2高压灭菌20 min[5-6]。
广西钦州市林业科学研究所采用正交设计法、选优法对国内外所有基本培养基进行筛选,结果表明,比较适于桉树培养的是B5、怀特(White)、N6、H、MS 5种培养基。经氮源与生长素相关试验研究,认为铵态氮与硝态氮的最优差值为173,这个
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