儿茶素在小鼠体内代谢动力学及其对代谢酶CYP3A4和芳香化酶作用研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

中图分类号 R969.1 学校代码 10356 UDC 615 密级 公开 硕 士 学 位 论 文 MASTER DISSERTATION 儿茶素在小鼠体内代谢动力学及其对代谢 酶CYP3A4 和芳香化酶作用研究 Research on the metabolic kinetics of catechin and its effect on the enzymes CYP3A4 and aromatase 作 者 刘洋 导师 葛建副教授 韩宝瑜教授 申请学位 理学硕士 培养单位 中国计量学院 学科专业 生物化学与分子生物学 研究方向 药物代谢动力学 二〇一四年六月 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的 研究成果，除了文中特别加以标注和致谢之处外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国计量学院 或其他教育机构的 学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均 已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 中国计量学院 有关保留、使用学位论文的 规定。特授权 中国计量学院 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借 阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。（保密的学位论 文在解密后适用本授权说明） 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 致 谢 岁月如梭，转瞬间研究生学习生活即将结束。在攻读硕士的这段时间里，得 到了众多老师和同学的无私帮助和悉心指导。值此毕业论文之际，向关心我和 帮助我的人表示衷心的感谢。 首先感谢我的导师葛建和韩宝瑜教授。在我攻读硕士学位期间，一位在我 的实验设计，论文写作面给予了细致认真的指导，一位在工作生活的方方面面 给予了我极大的帮助和关怀。借此机会，谨向两位老师致以崇高的敬意和衷心 的感谢! 还要感谢生命科学学院的崔林老师，在我遭遇挫折和困惑的时候，崔老师 像母亲一样给予了我很多生活工作上的教导和叮咛，让我学习到知识的同时， 也使我的研究生生活更加阳光快乐。 感谢校研究生处对我们研究生工作学习的大力支持。同时还要感谢同一个 实验室的李明揆、胡少青、张虹莉、沈钰明、戴灵豪等同学在实验过程中给予 我的帮助和支持，也要感谢王梦馨老师，周宁宁、纽羽群、张新亭等同学,他们 在我实验、学习中提出了很多宝贵的意见和建议，感谢一直在实验和学习中给 予我很多帮助的 11 级生命科学学院的全体同学，大家相互学习，互帮互助形成 了良好的学风氛围。 最后要感谢我的母亲，在三年的研究生生活中给予了我极大的支持和鼓励， 不论遭遇怎样的境遇，始终给予我无微不至的关怀和照顾，正是母亲的坚强， 乐观影响着我、鼓励我，使我得以顺利完成学业。 刘洋 2014 年 6 月 儿茶素在小鼠体内代谢动力学及其对代谢酶 CYP3A4 和芳香化 酶作用研究 摘要 ：儿茶 素生物 活性研 究如今 方兴未 艾，其抗 氧化、抗癌 等活性 功 能的 实现依 赖于儿 茶素体 内良好 的代谢 动力学（吸收 、分布 、代谢 、排泄 ） 特征 和较高 的生物 利用度 水平。因此，考察 儿茶素 在体内 的动态 变化过 程， 评价 其吸收 、分布 与代谢 消除等 代谢动 力学特 征，增 强口服 生物利 用度， 并探 索其对 相关代 谢酶作 用，为今 后茶叶 及相关 产品的 深入开 发提供 理论 依据。目前 国内外 学者对 于儿茶 素的研 究主要 集中于 其有效 成分的 提取纯 化以 及药理 活性等 方面的 研究，关于 儿茶素 在体内 外代谢 规律以 及对代 谢 酶干 扰机制 方面研 究，至 今报道 较少。 本课题以成年 ICR 小鼠为研究对象，建立了小鼠血浆、肝脏、脾脏、睾丸 等组织液中儿茶素 EGCG 的反相高效液相色谱（RP-HPLC）检测方法，同时比 较了儿茶素 EGCG 在这些组织中代谢动力学和消除特征，探索了儿茶素 EGCG 在不同组织中分布消除规律。同时 利用荧 光定量 PCR、荧光 免疫组 织化学 等 分子 生物学 手段探 索了儿 茶素对 代谢酶 CYP3A4 和芳 香化酶 的作用 。最 后，利用建立的检测方法及已阐明的代谢动力学规律，就制 备生物 利用度 增强 型的 儿茶素 口服液 进行了 进一步 探索。 1、儿茶素EGCG在小鼠体内代谢动力学和组织分布研究 采用 SPF 级的成年 ICR 雄鼠，EGCG 腹腔注射后，不同时间点采集组织， 收集粪便、尿液、组织及排泄物，经匀浆、液-液萃取后，利用所建立的 HPLC 分析方法检测其中 EGCG 含量