恶性胸水中Treg通过依赖IFN-γ的机制抑制Th17细胞的增殖和分化-内科学专业论文.docxVIP

目 录 缩略词表……………………………………………………………………… 2 摘 要……………………………………………………………………… 4 Abstract……………………………………………………………………… 6 引 言……………………………………………………………………… 8 实验材料……………………………………………………………………… 11 实验方法……………………………………………………………………… 12 实验结果……………………………………………………………………… 17 讨 论……………………………………………………………………… 25 结 论……………………………………………………………………… 29 参考文献……………………………………………………………………… 30 综 述……………………………………………………………………… 35 致 谢……………………………………………………………………… 43 中英文对照缩略语 英文缩略语 英文全称 中文全称 Th17 helper T lymphocyte 17 辅助性 T 细胞 17 IL-17 Interleukin-17 白细胞介素-17 Treg regulatory T cell 调节性 T 细胞 Foxp3 forkhead/winged-helix transcription factor 叉头/翼状螺旋转录因子 ROR-γt retinoid related orphan receptor-γ 维 A 酸孤儿受体-γt TGF-β transforming growth factor- β 转化性生长因子-β TNF-α tumor necrosis factor-α 肿瘤坏死因子-α T-bet transcription factor T-bet 转录因子 T-bet IFN-γ Interferon-γ 干扰素-γ LLC Lewis lung cancer 路易斯肺癌 SPF Specific pathogen Free 无特定病原体 PMA Phorbol 12-Myristate 13 Acetate 佛 波醇 12- 肉 豆蔻 酸-13- 乙酸 BFA Brefeldin-A 布雷菲德菌素 A PCR transcription-polymerase chain reaction 多聚酶链式反应 RPMI-1640 RPMI-1640 medium 改良型 1640 培养基 PBS phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 rpm rotatlon per minute 转/分 恶性胸水中 Treg 通过依赖 IFN-γ的机制抑制 Th17 细胞的 增殖和分化 华中科技大学附属协和医院呼吸内科 研究生：徐欠欠 导师：马万里 施焕中 中文摘要 目的：探讨在小鼠恶性胸腔积液中是否存在Th17细胞/Treg细胞的失衡以及Treg 细 胞（ CD4+CD25+ Foxp3+regulatory T cell) 调 节Th17 细 胞(helper T lymphocyte, Th17)增殖和分化的可能机制。 方法：通过胸膜腔内直接注入同源的肿瘤细胞（Lewis lung cancer，LLC细胞） 建立C57BL/6小鼠（野生型和IFN-γ－/－型）的恶性胸腔积液模型，用流式细胞术 分别检测野生型模型小鼠以及IFN-γ－/－型模型小鼠恶性胸腔积液、外周血、脾脏 中的Treg细胞和Th17细胞的数目及比例，同时检测未处理对照组野生型小鼠外周 血、脾脏中的Treg细胞和Th17细胞的数目及比例。检测野生型小鼠胸腔积液、外 周血、脾脏以及对照组小鼠外周血、脾脏中CD4+IFN-γ+T细胞的数目。最后对两 组模型小鼠以及正常对照小鼠对应组织中的各项指标进行对比。小鼠胸膜腔内肿 瘤组织行石蜡切片，HE染色，验证肿瘤性质。 结果：与外周血、脾脏相比，C57BL/6小鼠恶性胸腔积液中的Treg细胞和Th17细 胞水平都升高，Th17细胞数目与Treg细胞成负相关。同时Th17细胞在IFN-γ－/－小 鼠恶性胸腔积液中明显比在野生型小鼠恶性胸腔积液中水平升高，Treg水平则没 有明显差异。 结论：以上结果表明，小鼠恶性胸腔积液中的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞可以抑 制Th17细胞的增殖和分化，而这种抑制作用可能是依赖IFN-γ的。 关键词：恶性胸腔积液；Treg细胞；Th17细胞；IFN-γ Treg ce ls suppress generation and differentiation of Th17 ce ls in malignant pleural effusi