儿童麻疹疫苗接种后远期疫苗特异性初始T细胞及记忆T细胞的表型研究-免疫学专业论文.docxVIP

儿童麻疹疫苗接种后远期疫苗特异性 初始 T 细胞及记忆 T 细胞的表型研究 中文摘要 目的： 通过研究儿童接种麻疹疫苗远期特异性初始 T 细胞和记忆 T 细胞的表型特 征，为接种麻疹疫苗的远期效果和新的接种策略提供理论指导。 方法： （1） 在家长志愿的基础上选择 2003 年 12 月～2010 年 9 月在深圳市龙岗区妇 幼保健院接种麻疹疫苗的 3～10 岁儿童为研究对象 32 例； （2） 抽取外周静脉血 3ml，分离淋巴细胞加入麻疹疫苗进行培养，设加麻疹 疫苗组为实验组，未加疫苗组为对照组，置 5%CO2、37℃培养箱中培养 50h；以 FCM 分别检测细胞表面分子：CD4/CD8、CD45RA、CD45RO、 CD62L、CCR7； （3） 外周静脉血分离淋巴细胞加入麻疹疫苗进行培养，实验设未加疫苗组为 对照组，置 5%CO2、37℃培养箱中培养 50h 后加入 CCK-8 试剂继续培 养 1h； 以 CCK-8 法检测细胞增殖，计算细胞增殖指数。 结果： （1） 对麻疹疫苗接种 32 例儿童外周血细胞进行分离培养，以 FCM 检测 CD4+ 、 CD8+细胞，结果外周血 PBMC 中 CD4+和 CD8+T 细胞所组成比例以 CD4+T 细胞为优势，经统计学处理有显著性差异 P﹤0.05。 （2） 用 FCM 检测 CD4+/CD8+CD45RA+初始 T 细胞亚群，CD4+CD45RA+初始 T 细胞对照组与实验组均高达 70%以上；CD8+CD45RA+初始 T 细胞对照组 与实验组均高达 80%以上，组间比较均无显著差异，P﹥0.05；同时按照 抗体水平高低分三组进行比较，组间比较均无显著差异，P﹥0.05。 （3） 用 FCM 检测 CD4+/8+CD45RO+记忆 T 细胞亚群，CD4+CD45RO+对照组 28.12%，实验组 29.55%，二组比较均无显著差异，P﹥0.05；CD8+CD45-RO+ 对照组 17.35%，实验组 21.89%，二组比较均无显著差异，P﹥0.05；同时 按照抗体水平高低分三组进行比较，组间比较均无显著差异，P﹥0.05。 2 （4） CD4+记忆 T 细胞根据归巢受体（CD62L）和趋化因子受体（CCR7）的表 达，CCR7+亚群检测对照组 84.37%，实验组 84.47%，CD62L+亚群检测对 照组 93.60%，实验组 95.00%，组间比较无显著差异，P﹥0.05。CD8+记忆 T 细胞 CCR7+亚群检测对照组 47.24%，实验组 50.55%；CD62L+亚群检测 对照组 61.30%，实验组 65.89%，组间比较无显著差异，P﹥0.05。 （5） 按麻疹疫苗接种后 3-5 年、6-7 年、8-10 年的不同时间分析 CD4/CD8 细胞 CD45RA+、CD45RO+、CCR7+和 CD62L+不同亚群，结果疫苗接种后不同时 间 T 细胞的亚群均无差异，P﹥0.05。 （6） 应用 CCK-8 法检测疫苗刺激后疫苗特异性细胞增殖情况，检测结果可见细 胞增殖指数均大于 0.8，大于 1.0 在本研究中为 17 例，占 54.84%。 结论： （1） 麻疹病毒是细胞内感染，因此对麻疹疫苗诱导机体的免疫力，研究记忆细 胞具有十分重要的意义，本研究表明麻疹疫苗接种儿童T细胞以CD4+为优势 细胞，其初始T细胞CD45RA+高达70%～80%。 （2）麻疹疫苗接种儿童根据CD45RA-/CD45RO+的表达，CD8+记忆T细胞在17%左 右，CD4+记忆T细胞高达28%～29%，记忆T细胞与抗体水平高低无关，其CD4+ 记忆T细胞为主要表型特征。 （3）麻疹疫苗接种儿童根据CCR7和CD62L表达进一步研究发现，记忆T细胞亚群 具有多样性，本研究均以中央型记忆细胞为主要表型特征；细胞增殖指数大 于1的高达54.84%，表明疫苗特异性记忆细胞增殖良好。 关键词：麻疹疫苗； 免疫接种；初始 T 细胞；记忆 T 细胞；表型 3 Study on the phenotypic characterization of naive and memory T cell after immunization with measles vaccine for children Abstract Objective: To investigate the phaenotype character of specific memory T-cell long term after measles vaccine inoculation on child and provide theory direction for long time effect and new inocu