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专题1基因工程1.1NA重组技术的基本工具.doc
选修3现代生物科技专题专题1基因工程
1.1 DNA重组技术的基本工具
一、基因工程的概念
例1】(2013大纲5)下列实践活动包含基因工程技术的是( )
水稻F,花药经培养和染色体加倍,获得基因型纯合新品种
抗虫小麦与矮秆小麦杂交,通过基因重组获得抗虫矮秆小麦
将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞,经组织培养获得抗病植株
用射线照射大豆使其基因结构发生改变,获得种子性状发生变异的大豆
二、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
例2】基因工程屮,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知 限制酶1的识别序列和切点是一G I GATCC —,限制酶II的识别序列和切点是一I GATC
一。根据图示判断下列操作正确的是( )
GGATCC 0 的基因 GATC
CCTAGG CTAG
注:Gene I和Gene II表示两种
标记基因lQ表不限制醣的识 别序列放大
H的基因和质粒均用限制酶II切割
目的基因和质粒均用限制酶I切割
质粒用限制酶II切割,目的基因用限制酶I切割
质粒用限制酶丨切割,目的基因用限制酶11切割
h三、“分子缝合针”——DNA连接酶 例3】据右图所示,有关工具酶功能的叙述不正确
h
參 ?參
的是( )
限制性内切酶可以切断a处,DNA连接酶可 以连接a处
DNA聚合酶可以连接a处
解旋酶可以使b处解开
连接c处的酶可以为DNA连接酶
四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
例4】(2011浙江6) ada (腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表
达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是( )
? ?
每个大肠杆菌至少含一个重组质粒
每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
每个限制性核酸P、j切酶识别位点至少插入一个ada
每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
课后练习题
练1】(2010全国115)下列叙述符合基因工程概念的是( )
B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株
用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株
向然界屮天然存在的噬菌体行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
练2】(2012叫川2)将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后,重新置入大肠杆菌 的细胞内,通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是( )
发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物
大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传
大肠杆菌质粒标记基因屮腺嘌呤与尿嘧啶含相等
生长激素基因在转录吋需要解旋酶和DNA连接酶
练3】(2013 ?云南师大附中月考)下列有关基因工程和酶的相关叙述,正确的是()
同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒,因此不具备专一性
运载体的化学本质与载体蛋白相同
限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸
DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键
练4】(2013 ?浙江十校岛三联考)下列有关培育转基因动物的相关叙述,正确的是( )
整个培育过程的设计和施工都是在细胞水平上进行的
培育转基因动物所需的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的
转基因动物的培育成功,表明科学家可打破物种界限,定向改造生物性状
转基因动物与原动物相比,由于发生了基因突变而使其基因型发生了改变
练5】(2013 ?苏州模拟〉关于DNA重组技术基本工具的说法正确的是( )
DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端
细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切
限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
天然的质粒可以直接用来作为载体
练6】(2013 ?无锡期末)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制性核酸 内切酶EcoRl酶切后得到的DNA分子仍是lOOObp,川Kpn\单独酶切得到400bp和600bp 两种长度的DNA分子,用EcoRh Kpn\同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA 分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是(
B.
EcoRl
1
Kpnl EcolU Kpnl 600 | 200 | 200 |
D.
r
Kpnl、
EcoRI
f \^Kpnl
EcoHi Kpn\ Kpnl
A. | 600 丨 200 丨 200
£coRI
C. EcoRl^ /
600Kpnl
600
1.2基因工程的基本操作程序
一、 目的基因的获取
例1】(2012浙江6)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B, 而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正 确的是( )
提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基闪B
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