蔬菜质量安全快速检测技术与应用教学讲义.pptVIP

蔬菜质量安全快速检测技术与应用 ;我国现行的主流检测技术体系;农药残留量快速检测方法;传统的农药残留量分析技术的一般过程 ;传统的农药残留量分析技术的优缺点 ;传统的农药残留量分析技术存在的问题 ;国内外现行的农药残留量快速检测方法;我国现行的农药残留量分析的总体解决方案 ;农药残留量快速检测技术的优缺点 ;我国现行的农药残留量快速检测技术 ;农药的分类 ;农药残留量快速检测技术的检测对象 ;蔬菜农药残留量危害程度评估及取样方法;产地蔬菜样品采集方法;产地蔬菜样品采集方法;常见蔬菜农药残留量的采集对象及检测部位;蔬菜农药残留量快速检测结果判定基本原则;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002） ;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002）;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002）;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002）;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002）;速测卡法测定结果;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002）;速测卡法（纸片法，GB/T 5009.199—2002）;酶抑制法（GB/T 5009.199-2002、NY/T 448-2001） ;1、试剂 pH8.0缓冲溶液：取11.9mg无水磷酸氢二钾与3.2mg磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。 显色剂：取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，在4℃冰箱中保存。 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱加8.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4℃冰箱中保存，保存期不超过一周。 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，但吸光度值应控制在0.3以上。 2、仪器 常量天平 37℃±2℃恒温水浴或恒温箱 分光光度计或快速测定仪;分析步骤 ① 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，檫去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取1g放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液浸没菜叶，每3min摇动一下烧杯，于10min后吸取2.5mL提取液于试管，待测。 ② 测定： 对照溶液测试：于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，于410nm波长下比色，记录反应3min的吸光度变化值或仪器记录值A0。 样品测试：于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，记录反应3 min的吸光度变化值或仪器记录值At。 ③ 结果的表述计算： 注意：使用速测仪可以直接读出抑制率值，而无须手工计算。;结果判定 ;CL-1型农药残留速测仪的操作步骤 ① 将阻断光路黑块放入速测仪的比色池内，接通仪器电源，此时仪器自动进入预热阶段，显示屏显示数值为1200； ② 仪器显示数值由1200减少为0，并发出“嘀”蜂鸣声时，表示仪器预热完成（整个过程约需时15min）； ③ 按下“0”按钮，进行调“0”操作，此时仪器显示数值为0或其左右的数值； ④ 取出阻断光路黑块，按下“100”按钮，进行调满度操作，此时仪器显示数值为100或其左右的数值； ⑤放入对照溶液，按下“对照”按钮，仪器将自动进行对照样品的测试，3min后，仪器发出“嘀”蜂鸣声时，表示对照溶液测试完成； ⑥取出对照溶液，放入待测样品，按下“样品”按钮，仪器将自动进行待测样品的测试，3min后，仪器发出“嘀”蜂鸣声时，表示样品溶液测试完成，此时按下再次“样品”按钮，仪器即可显示样品抑制率； ⑦其余样品的测定重复步骤⑥的操作即可。;部分农药浓度与抑制率对照（实验条件：37℃，乙酰胆碱酯酶）;酶抑制法的使用注意事项 葱、蒜、胡萝卜、生姜、韭菜等蔬菜中含有破坏酶活性或使蓝色产物褪色的物质，处理这类样品时，不要剪得太碎，浸提时间不要太长，必要时可采取整株（体）蔬菜浸提法。 如室温低于20℃，建议使用30℃水浴，即提取液要在水浴中预热，并且加入酶液后的试管也需要放置于水浴中，同时室温也应控制在20℃以上。 速测试剂对农药非常敏感，测定时如果附近喷洒农药或使用卫生杀虫剂，以及操作者和器具沾有微量农药，都会对检测结果带来影响。 速测仪长期处于开机等待状态时，应将阻断光路黑块放入速测仪的比色池内，避免仪器感光元件因过度疲劳而损坏。 标准NY/T 448—2001使用的丁酰胆碱酯酶对甲基对硫磷、乐果、毒死蜱、二嗪磷等农药不太灵敏，检出浓度均在10mg/kg以上。;方法特点 该方法是与国际接轨的一个农药残留量快速检测方法，它等同于美国公职分析化学师协会AOAC 12th 29.049-29.055《食品中有机磷农药残留测定—胆碱酯酶抑制法》方法，在国外已得到普遍的应用，检测结果更具可比性。 方法检测对象广泛（有机磷农药和氨基甲酸酯类农药），而且适用于一些