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银杏叶提取工艺正交试验的研究 　　摘要：目的 以总黄酮醇苷、萜类内酯的综合转移率为指标，确定银杏叶最佳提取工艺。方法 采用正交设计方法，系统考察乙醇浓度、料液比、提取时间3个因素对银杏叶提取工艺的影响，利用高效液相色谱法测定总黄酮醇苷、萜类内酯的含量，计算转移率。结果 最佳提取工艺条件为：采用85%乙醇加热回流提取3次，第1次加5倍量（V/W）溶剂提取3 h，后2次分别加入3倍量（V/W）溶剂提取2 h。结论 本工艺操作简单、合理、节能、高效，适用于工业化生产。 　　关键词：银杏叶；总黄酮醇苷；萜类内酯；转移率；正交试验 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.08.023 　　中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）08-0078-03 　　银杏Ginkgo biloba L.又名白果、公孙树、鸭脚子、鸭掌树，是最古老的中生代孑遗的稀有植物之 　　基金项目：浙江省科技计划项目（2009E10009）；浙江省企业研究院建设计划（2010E90011） 　　通讯作者：陈仲良，Tel：0571E-mail：zlchen70@ 　　一[1]。银杏为1科1属1种的特殊植物，并有“活化石”植物之称[2]。药用银杏叶一般为九、十月份采收的新鲜绿叶快速干燥而得[3]。银杏叶主要含黄酮类化合物和萜类内酯两类活性成分，具有清热利湿、凉血解毒、降低血脂、强筋活络、增强免疫力、延缓衰老等功效，其中黄酮类化合物主要为槲皮素、山柰酚、异鼠李素及其苷类，萜类内酯主要有白果内酯及银杏内酯A、B、 　　参考文献： 　　[1] 张云芳.正交实验优选当归挥发油的提取工艺[J].时珍国医国药， 2007，18（8）：1962-1963. 　　[2] 何文江，陈向东，王文涛，等.肉桂提取工艺及其挥发油包合制备工艺的研究[J].中药材，2012，35（9）：1511-1515. 　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录63. 　　[4] 吕荷，张涛.中药挥发油测定方法研究[J].中成药，2003，25（1）：80-82. 　　[5] 谢秀琼.中药新制剂开发与应用[M].北京：人民卫生出版社，2006：83. 　　[6] 施明毅，李建利，谢燕，等.正交试验法优选冠心康胶囊挥发油提取工艺条件[J].中药与临床，2012，3（5）：12-14. 　　[7] 滕海英，祝国强，黄平，等.正交试验设计实例分析[J].药学服务与研究，2008，8（1）：75-76. 　　（收稿日期：2013-08-14；编辑：陈静） 　　C，毒性成分为银杏酸[4]。对银杏叶提取物的研究近年来报道较多[5-8]，大都以黄酮类化合物或萜类内酯为考察指标。本研究采用正交设计方法，以银杏总黄酮醇苷、萜类内酯的综合转移率为指标，确定银杏叶的最佳提取工艺，旨在针对工业化生产的特点，降低生产成本，提高生产效率。 　　1 仪器与试药 　　TCS-150电子秤，浙江永康市富克斯工贸有限公司；AE240分析天平、AX205电子天平，上海梅特勒-托利多仪器有限公司；Agilent1260系列高效液相色谱仪，美国Agilent；DFT-200粉碎机，温岭市林大机械有限公司；W201S恒温水浴锅，上海申生科技有限公司；R系列旋转蒸发仪，上海申生科技有限公司；DZF-6050真空干燥箱，上海精宏实验设备有限公司。 　　药材购于江苏东台市头灶镇大地银杏叶烘干厂，经浙江大学药学院现代中药研究所吴永江教授鉴定，为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶。槲皮素（批号100081-200406）、山柰酚（批号110861- 200606）、异鼠李素（批号110861-200407）、银杏内酯A （批号110862-200608）、银杏内酯B（批号110863- 200608）、银杏内酯C（批号110864-200505）、白果内酯（批号110865-200404）对照品购于中国食品药品检定研究院。乙醇（分析纯，安徽安特生物化学有限公司），甲醇（分析纯，上海振兴化工一厂），甲醇、四氢呋喃（色谱级，德国MERCK）。 　　2 方法与结果 　　2.1 总黄酮醇苷含量测定 　　照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）银杏叶项下方法测定银杏叶及浸膏中总黄酮醇苷的含量，计算转移率。 　　2.2 萜类内酯含量测定 　　照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）银杏叶项下方法测定银杏叶及浸膏中萜类内酯的含量，计算转移率。 　　2.3 综合转移率评价 　　本试验以银杏总黄酮醇苷、萜类内酯的综合转移率作为指标，评价银杏叶提