各种离子和生物蛋白在大管电泳中分离技术的-研究.pdf

3．2实验材料与仪器………………………………………………………………37 3．2．1实验材料……………………………………………………………………3’ 3．2．2实验仪器…………………………………………………………………．．37 3．3溶液的配制………………………………………………………………：……38 3．4实验装置示意图………………………………………………………………．38 3．5实验步骤………………………………………………………………………．38 3．6实验结果及分析………………………………………………………………39 3．6．1最佳检测波长的确定………………………………………………………39 3．6．2两性电解质的选择…………………………………………………………40 氏 3．6．3酸性缓冲溶液的选择………………………………………………………4l 3．6．4添加剂羟乙基纤维素(HEC)浓度的确定……………………………。42 q 3．6．5大管等电聚焦电泳对伴清蛋白的分离结果……………………………．．42 3．6．6大管等电聚焦电泳对核糖核酸酶的分离结果…………………………。43 3．6．7大管等电聚焦电泳对碳酸酐酶的分离结果………………………………44 3．6．8大管等电聚焦电泳两步法对p．乳球蛋白的分离………………………。45 3．7，J、结…………：…………………………………………………………………………………………．46 第四章结论及展望…………………………………………………………………47 4．1结论………………………………………………………………………………………………………．．47 4．2展望………………………………………………………………………………………………………。47 参考文献……………………………………………………………………………．．48 致 谢………………………………………………………………………………………………………．54 第一章文献综述 第一章文献综述 1．1毛细管电泳技术 1．1．1毛细管电泳简介 高效毛细管电泳(highperformancecapillary 技术和现代微柱分离技术相结合的产物，这项新技术自80年代后期以来得到迅速 发展，使得分析科学从微升水平进入纳升水平，并使细胞分析甚至单分子分析成 为可能，分离的基本原理是在电场力的驱动下，目标组分在毛细管中按其迁移速 度和分配行为上的差异而实现高效、快速的分离。具有分离效率高、分析速度快、 溶剂消耗少、样品用量少的特点和优势，同时又由于操作模式的多样化，可应用 范围广，使得毛细管电泳成为近年来发展速度最快的分析化学研究领域之一，在 生物大分子的分离分析领域发挥着重要的作用【1．5】。 HPCE作为一种新型液相分离技术，与高效液相技术有着巨大的互补性，从效 率、分离速度、样品用量和成本来说，CE更是显示了强大的优势。如今，世界上 不少分析实验室配备有CE仪器，药物【61、医学【7】、农药吲及食品【91等领域均开始 使用CE进行常规分析。 1．1．2毛细管电泳仪 1．1．2．1仪器结构 毛细管电泳仪的基本装置由毛细管、缓冲液槽、进样器、高压电源和检测器 组成。 典型的毛细管电泳仪的组成，如图1-1所示。 图1．1毛细管电泳仪器组成示意图 SchematicoftheCE Figure．1·l drawing system 第一章文献综述 1．1．2．2进样方式 目前毛细管电泳技术中常规的进样方式包括流体动力学进样