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突触形成机理及相关疾病剖析 　　摘要：指出了脑基于神经环路连接的复杂性与多样性，成为了最复杂的器官，脑调节日常的行为、意识，维持思维及其他重要的生理活动。化学突触是神经环路的基本单元，细胞粘附分子通过细胞间的蛋白质相互作用参与突触形成，招募突触组分蛋白和骨架蛋白，来形成稳定的突触连接和调节突触的功能。突触形成与成熟异常可导致神经疾病的发生，如自闭症和阿尔茨海默病。综述了突触形成的研究历史，突触形成蛋白和突触形成异常相关疾病，并展望了突触形成研究未来的发展及面临的挑战。 　　关键词：突触形成；细胞黏附分子；神经疾病 　　中图分类号：R392.9 文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2016）10-0232-04 　　1.突触形成研究历史 　　1897年，英国神经生物学家Sherrington发现神经元之间是不连续的，并创造性地将神经元之间的连接部位命名为“突触”。1954年，俄裔美籍犹太科学家Stanford Palay，利用电子显微镜首次成功地看到了鼠的小脑神经细胞突触结构，它直径约为1μm，由突触前的轴突、突触后的树突及突触前后之间的突触间隙构成。同年，阿根廷细胞生物学家Eduardo De Robertis和美国细胞生物学家Stanley Bennett利用电子显微镜看到了蛙交感神经节和蚯蚓神经索的突触间隙。 　　1992年美籍德国科学家Thomas C.Sndhof认为可能是突触前后膜上面有一些跨膜的蛋白通过相互作用联接在一起，介导前一个神经元与后一个神经元形成突触，他们发现蛛毒素（latrotoxin）可以强烈地诱导神经递质释放，推测蛛毒素蛋白可能与突触上某种蛋白质发生作用，用蛛毒素蛋白为亲和层析诱饵，在大脑样本中纯化到了许多与蛛毒素结合的蛋白质，肽断分析后发现了一个位于神经突触前的跨膜蛋白质，命名为neurexin并以neurexin（Nrx）蛋白为诱饵，发现了Nrx的位于突触后的配体蛋白-neuroliginL。 　　2000年，Peter Scheiffele在传代培养的HEK293细胞中过表达neuroligin（NL）蛋白约24 h后将其消化，加入到原代培养的神经元中共培养36 h，意外发现过表达NL的HEK293细胞周围聚集了很多突触，而对照组HEK293细胞周围突触分布零散。2004年，Ethan R.Graf在传代培养的HEK293细胞中过表达Nrx，加入到原代培养的神经细胞共培养，发现过表达Nrx蛋白的HEK293细胞周围也聚集了大量的神经元。从此发现了参与突触形成最重要的粘联蛋白家族Nrxs和NLs，而不是最起始的粘联蛋白。 　　突触形成是一个动态过程，表现为突触前最起始的粘联蛋白与突触后的跨膜蛋白先相互识别，通过相互作用将突触前与突触后联接起来，介导突触形成开始，突触前后建立初步联系后，招募更多的粘联蛋白如Nrxs和NLs聚集到突触前后膜上，蛋白通过同源或异源相互作用牢牢结合，类似桥梁一样将窠触前和突触后紧密连接，突触形成稳定。 　　2000年至今，科学家相继发现了一些新的参与突触形成的跨膜蛋白.2002年，Thomas C.Stidhof实验室报道突触细胞粘附分子（SynCAM）介导突触形成。2009年Ann Marie Craig实验室通过全基因组范围内大规模筛选，鉴定富含亮氨酸的跨膜蛋白（LRRTM）参与突触形成，随后Thomas C.Sndhof实验室在报道的LRRTM基础上，发现了LRRTM的配体为突触前的Nrx蛋白。 　　自1992年发现第一个参与突触形成的蛋白Nrx至2016年，已报道22种蛋白家族参与突触形成，包含Contactin，NCAM，Nectin，SALM等家族蛋白，其中NL2蛋自强度最强，但与全基因组2～3万个基因相比，被发现的突触形成蛋白仅占约1‰。 　　2006年，Thomas C.Sadhof和NilS Brose实验室构建NLI-3基因敲除小鼠，体内和体外实验表明NLl-3基因敲除并没有抑制神经元突触的形成和突触结构的变化。2009年LRRTM基因敲出小鼠的体内和体外实验结果也是没有抑制突触的形成和结构的变化。推测不同粘联蛋白之间可能起到了补偿作用，是否还存在突触形成的核心蛋白，这一突触形成的奥秘至今没有被完全解开。 　　2.参与突触形成蛋白 　　2.1Nrx 　　目前报道参与突触形成的蛋白有22种左右，但是许多蛋白的功能未完全清楚。哺乳动物神经元中含有3个Nrx基因（Nrx1～3），每个基因都编码α-Nrx和β-Nrx两种蛋白。1995年Sfidhof实验室发现Nrx与突触后的NL蛋白识别且相互作用结合在一起。2004年，科学家首次将Nrx蛋白在非神经元细胞中过表达与神经元共培养，鉴定Nrx基因参与突触形成。2009年，