丹参注射液对宫内感染致早产仔鼠脑室周围白质软化症中NGF及 GDNF表达的影响-中医儿科学专业论文.docx

摘要 摘要 丹参 丹参 注 射液 对 宫内 感 染致 早 产仔 鼠 脑室 周 围白 质 软化 症 中 NGF 及 GDNF 表 达 的影 响 - - PAGE 13 - - - PAGE 10 - 摘 要 目的：通过观察丹参注射液对宫内感染致早产仔鼠脑室周围白质软化组织中 神经生长因子（NGF）和胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）水平的调节作用， 探讨活血化瘀药物丹参注射液改善早产脑室周围白质软化的作用机制，为临床治 疗提供理论依据。 方法 ：（ 1 ） 动 物 模 型 制 备 ： 24 只 脂 多 糖 (LPS) 组 孕 鼠 孕 第 16 天予 LPS350μg/kg·d，6 只生理盐水组孕鼠予同剂量的生理盐水，连续 2 天腹腔注射。 孕 22 天前出生的仔鼠为早产鼠。仔鼠出生后随机选取 LPS 组和对照组各 2 只孕 鼠取子宫和胎盘行 HE 染色，判断宫内感染情况。LPS 组和对照组仔鼠各 10 只断 头取脑组织行 HE 染色，观察脑白质损伤情况。（2）分组：随机选 LPS 组早产仔 鼠 40 只，LPS 组仔鼠随机分为 4 组，每组 10 只，分别为：丹参注射液高剂量组 （A）、丹参注射液低剂量组（ B）、神经节苷酯组（C）、模型组（D）；随机选取 生理盐水组足月产仔鼠 10 只作为空白对照组（E）。（3）干预方法：生后第 2 周 A 组予丹参注射液 9ml/㎏·d 腹腔注射，B 组予丹参注射液 4.5ml/㎏·d 腹腔注射，C 组予单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液 6ml/㎏·d 腹腔注射，D 组与 E 组予生理 盐水 9ml/㎏·d 腹腔注射，干预 1 周。（4）21 日龄时对 5 组大鼠行神经行为学检测 （悬吊试验、斜坡试验 、Cylinder 试验），免疫组化方法对脑组织 NGF、GDNF 进行检测。 结果：（1）30 只雌性大鼠，LPS 组 24 只孕鼠，6 只分娩前死亡，13 只提前 分娩，5 只足月分娩，共娩出早产仔鼠 79 只，死产仔鼠 46 只，足月仔鼠 49 只。 生理盐水组孕鼠 6 只，均顺利足月生产，共娩出活产足月仔鼠 57 只。与生理盐水 组仔鼠相比，LPS 组仔鼠出生后皮肤颜色紫绀、活动少、体重低。（2）LPS 组孕 鼠子宫壁及胎盘病理 HE 染色可见血管充血、水肿，可见大量中性粒细胞浸润。 LPS 组仔鼠脑室周围白质出现染色淡、结构疏松、神经纤维排列紊乱、可见出血 改变等病理变化。（3）神经行为学检测：①与对照组相比，模型组及各干预治疗 组神经行为学检测均有显著差异（P﹤0.01）；②与模型组相比，丹参注射液低剂 量组、高剂量组及神经节苷酯组神经行为学检测均有统计学意义；③与丹参注射 液低剂量组相比，丹参注射液高剂量、神经节苷酯组 3 组相互间无统计学差异（P ﹥0.05），说明丹参注射液低剂量、高剂量和神经节苷酯在改善仔鼠的神经行为学 方面效果相当或者与样本量较少有关。 (4) NGF 与 GDNF 的表达：模型组及丹参 注射液低剂量组、高剂量组、神经节苷酯组 阳性表达增强，对照组表达较少 （P ﹤0.01）；丹参注射液低剂量组、高剂量组、神经节苷酯组阳性表达均较模型组明 显增强（P﹤0.01）；丹参注射液低剂量组、高剂量组及神经节苷酯组 3 组相比， 相互间差异无统计学意义（P﹥0.05）。 结论：（1）宫内感染可导致早产仔鼠神经行为学改变、使脑组织中 NGF 和 GDNF 表达上调。（2）丹参注射液对宫内感染致早产仔鼠脑组织中 NGF 和 GDNF 表达有调节作用，其减轻脑损伤机制可能与上调脑组织中 NGF 及 GDNF 表达有 关，这为活血化瘀药物丹参注射液改善宫内感染致早产脑室周围白质软化提供了 一定实验依据。（3）“血瘀”是宫内感染所致早产脑室周围白质软化 的主要病机， 中医活血化瘀治疗有着极其重要的作用 。 关键词：宫内感染；脑室周围白质软化；NGF； GDNF；丹参注射液； Ab Abstract 丹参 丹参 注 射液 对 宫内 感 染致 早 产仔 鼠 脑室 周 围白 质 软化 症 中 NGF 及 GDNF 表 达 的影 响 Effects of Danshen injection on expressions of NGF and GDNF during lipopolysaccharide-induced periventricular leukomalacia in the early neonatal rat Song Shufen（Pediatrics of Traditional Chinese Medicine） Directed by Ma Bingxiang Abstract Objective: To study effects of Dans