丹参注射液对宫内感染炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症SYP、GAP-43表达的影响-中医儿科学专业论文.docx

摘要 摘要 丹参注射液对宫内感染/ 丹参注射液对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症 SYP、GAP-43 表达的影响 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 10 摘 要 目的：观察丹参注射液对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑室周围白质软化症突触 素（SYP）和神经生长相关蛋白（GAP-43）表达的影响，探讨活血化瘀药物改善 宫内感染/炎症致早产脑损伤的机制，提出宫内感染/炎症致脑白质软化症的中医 药治疗可以从瘀论治的新理论。 方 法 ：（ 1 ） 动 物 模 型 制 备 ： 24 只 孕 第 16 天的脂多糖 (LPS) 组大鼠予 LPS350μg/kg·d，连续两天腹腔注射，6 只孕鼠于孕第 16 天予等剂量生理盐水腹 腔注射，连续两天作为对照组。孕 21 天前分娩的仔鼠为早产仔鼠。记录两组孕鼠 的分娩时间及出生体重，观察新生仔鼠的行为活动。仔鼠出生后即刻随机选 LPS 组和对照组孕鼠各 4 只取子宫和胎盘 HE 染色观察宫内感染情况，判断标准为大 量中性粒细胞浸润。随机选 LPS 组和对照组仔鼠各 10 只断头取脑 HE 染色，观 察脑室周围白质损伤情况。（2）随机选 LPS 组孕鼠早产仔鼠 40 只，随机分为 4 组，每组 10 只。分别为：丹参注射液高剂量组（ A），丹参注射液低剂量组（B）， 神经节苷脂组（C），模型组（D）。随机选对照组孕鼠足月仔鼠 10 只,为正常对照 组（E）。5 组大鼠同等条件下喂养。干预方法：LPS 组孕鼠仔鼠每组随机选取 10 只，于生后第 8 天给予干预。A 组予丹参注射液高剂量 9ml/㎏·d，B 组予丹参注 射液低剂量 4.5ml/㎏·d，C 组予单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液 6mg/㎏·d，D 组予生理盐水 9ml/㎏·d，E 组予生理盐水 9ml/㎏·d，均腹腔注射，连续 7 天。随 后同条件继续喂养至 21 日龄。（3）21 日龄时对 5 组大鼠进行神经行为学测试（采 用悬吊试验、斜坡试验、Cylinder 试验），并取脑组织采用免疫组化方法对 SYP、 GAP-43 进行测定。 结果：(1) LPS 组 24 只孕鼠中 6 只孕鼠分娩前死亡，13 只孕鼠娩出早产仔鼠 79 只，死产仔鼠 41 只，余 5 只足月顺利生产，娩出足月仔鼠 49 只，死产仔鼠 5 只，剔除足月鼠；对照组 6 只孕鼠均足月顺利生产，孕鼠无提前分 娩及死亡，共 娩出活产足月仔鼠 57 只，无死产仔鼠；与正常对照组仔鼠相比，LPS 组仔鼠出生 时皮肤颜色紫绀、体重低、活动少； LPS 组子宫及胎盘病理 HE 染色见大量中性 粒细胞浸润，说明模型组孕鼠存在宫内感染； LPS 组仔鼠脑组织白质结构稀疏， 胶质细胞聚集，可见出血改变。(2) 于 21 日龄行为学测试，3 种方法行为学测试， 结果：药物干预组与模型组相比，药物干预组仔鼠反应快，四肢活动灵活，悬吊 时上肢抓握时间较长，在斜坡停留时间短，后足站立时前足触壁次数百分比值较 高，而模型组仔鼠反应迟钝，四肢活动不如干预组，悬吊时上肢抓握时间 短，在 斜坡上停留时间长，后足站立时前足触壁次数百分比值较低，两组之间差异有极 显著意义(P＜0.01)；药物干预组与正常对照组相比，正常对照组反应较快，两组 之间差异有极显著统计学意义(P＜0.01)；药物干预组中丹参高剂量组与神经节苷 脂组相比，两组仔鼠反应均快，四肢活动灵活，两组之间差异无显著统计学意义 (P＞0.05)；药物干预组中丹参高剂量组与丹参低剂量组相比，两组仔鼠均反应快， 活动灵活，两组之间差异无显著统计学意义(P＞0.05)；药物干预组中神经节苷脂 组与丹参低剂量组相比，两组仔鼠四肢活动均灵活，两组 之间差异无显著统计学 意义(P＞0.05)。(3)丹 参注射液干预治疗后 使宫内感染 /炎症致早 产仔鼠脑室周 围 白质软化症中 SYP、GAP-43 阳性表达均增加。SYP、GAP-43 结果：药物干预组 与模型组相比，药 物 干预组对宫内感染 / 炎症致早产仔鼠脑 室 周围白质软化中 SYP、GAP-43 阳性表达较模型组增多，两组之间差异有极显著意义 (P＜0.01)；药 物干预组与正常对照组相比，正常对照组中 SYP、GAP-43 阳性表达较药物干预 组增多，两组之间差异有极显著统计学意义(P＜0.01)；药物干预组中丹参高剂量 组与神经节苷脂组相比，两组仔鼠经药物干预后脑组织 SYP、GAP-43 均增多， 两组之间差异无显著统计学意义(P＞0.05)；药物干预组中丹参高剂量组与低剂量 组相比，两组仔鼠 SYP、GAP-43 阳性表达均增多，两组之间差异无显著统计学 意义(P＞0.05)；药物干预组中神经节苷脂组与丹参低剂量组相比，两组仔鼠 SYP、 GA