防哮灵胶囊对哮喘模型大鼠肺泡灌洗液及血清中细胞因子含量的影响-中医内科学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 引 言 支气管哮喘（简称“哮喘”）是一种世界范围内严重危害公众健康的疾病。近 年来，哮喘的发病率和死亡率更呈逐年增高趋势，所造成的社会负担和经济负担超过 了结核病和艾滋病的总和，该现象已引起世界范围内的广泛关注。 近年来，现代医学对哮喘发病机制的研究有了很大的进展和突破，气道炎症学 说成为哮喘发病机制的最主要理论。除经典的哮喘病治疗方法和药物外，又逐渐开发 出对哮喘病发病某一环节具有一定影响的细胞因子治疗和基因治疗等方法。这些治疗 方法对哮喘急性发作，特别是重症哮喘的综合治疗取得了良好效果。然而，如何预防 哮喘的再发，即缓解期的综合预防性治疗，则存在着亟待解决的问题，如：缓解期喷 吸糖皮质激素药物来预防哮喘再发是针对气道炎症病理改变，而气道炎症毕竟是变态 反应所形成的最终病理结果，所以仅仅立足于局部抗炎，不从全身调节免疫等多环节 入手，恐难实现有效预防哮喘再发的目标；另外，当前无论何种防治措施，都难以收 到理想的效果，且均存在着不可忽视的毒副作用，其临床疗效尚未得到根本上的提高。 中医药防治哮喘有着悠久的历史，特别对哮喘缓解期的防治具有不可替代的优 势。例如：根据中医“急则治其标，缓则治其本”的原则，或从辨病论治或从辨证论 治，所拟方药针对哮喘病机的本质，大多是以扶正为主，诸多实验表明，其作用机制 是多层次、多靶点、多环节的综合发挥。再如：防治哮喘的常用中药无毒副作用，可 较长时间服用，能充分体现其治未病的优点。所以加强中医药防治哮喘的临床研究以 及作用机理的现代研究具有重要的意义。 防哮灵胶囊是导师周兆山教授以补肾渗湿为治法，通过长期临床实践总结出的 经验方；该胶囊服用方便，用于预防哮喘的再发，有较好的临床疗效，长期服用，未 见毒副作用。为了探讨防哮灵胶囊防治哮喘的作用机制，为临床提供现代实验依据， 笔者初步进行了防哮灵胶囊对哮喘模型大鼠肺泡灌洗液及血清中相关细胞因子含量 影响的实验研究。 实验研究 针对哮喘的主要病理基础—气道慢性变应性炎症及其多种调节机制，选择与哮喘 慢性气道炎症关系密切的细胞因子为指标，运用病理学、放射免疫、酶联免疫等检测 技术，观察分析防哮灵胶囊治疗后上述指标的变化，以探讨防哮灵胶囊防治哮喘的机 理。 一 实验材料 (一) 实验动物 实验选择清洁级健康雄性 Wistar 大鼠 84 只，购自山东鲁抗医药集团有限公司， 许可证号为：SCXK 鲁体重 200 士 20g，月龄 2～3 月，在室温 18～22℃， 湿度 28%环境中饲养 1 周后使用。动物分组：将 84 只雄性 Wistar 大鼠随按随计数字 表法分为 7 组，即：正常对照组、模型对照组、地塞米松组、防哮灵胶囊低剂量组、 防哮灵胶囊中剂量 1 组、防哮灵胶囊中剂量 2 组、防哮灵胶囊高剂量组，每组 12 只。 每 4 只一笼，分笼饲养，以常规饲料喂食。 (二) 实验用药品 1、卵蛋白(OVA) 冻干粉 10g/支，由美国 sigma 公司生产 Grade II A5253，批号 为 070402，由华美生物工程公司上海分公司分装，临用前配制成 10%和 1%溶液，过 滤消毒后置 4℃冰箱保存备用。 2、水合氯醛：由海慈医疗集团制剂室提供，临用前配置成 10%的溶液置 4℃冰箱 备用。 3、地塞米松片：天津天药药业股份有限公司生产,药品批号为：0504385；用前 磨碎，溶于生理盐水，制成浓度为 0.033mg/ml 溶液备用。 4、防哮灵胶囊：熟地、山萸肉、淫羊藿、补骨脂、薏苡仁、茯苓等，按（2:2:3:1:3:3） 比例，由青岛市海慈医疗集团制剂科制备，每粒 0.3g。用前配成浓度分别为 0.02g/ml， 0.04g/ml，0.08g/ml 混悬液备用。 (三) 实验用试剂 1、大鼠干扰素-γELISA 试剂盒由晶美生物科技有限公司提供，产品编号为： FRK0002。 2、大鼠白介素-4ELISA 试剂盒由晶美生物科技有限公司提供，产品编号为： FRK0004。 3、大鼠白介素-13ELISA 试剂盒由晶美生物科技有限公司提供，产品编号为： A1010A0311。 (四) 实验仪器 1、超声雾化器： 江苏鱼跃医疗设备有限公司生产，上海鱼跃医疗设备有限公司 经销，产品标准号 Q/3211812YQ007-2000。 2、光学显微镜：Nikon YS100 型。 3、微量移液器及相应 tip：20、200、1000μ1 tip 及 1500μleppendorf 管，GILSON 公司产品。 4、隔水式电热恒温培养箱：PYX-DHS-X，上海市跃进医疗器械厂。 5、电子天平：Bs110 型，Sartorius 公司产品。 6、WH 3-微型旋涡混合仪：上海沪西分析仪器厂。 7、雾化箱：海