丹参注射液增强氟尿嘧啶对小鼠Lewis肺癌抑制作用及机理研究-中医妇科学专业论文.docx

成都中医药大学硕士毕业论文 成都中医药大学硕士毕业论文 PAGE PAGE 1 中文摘要 通过检测肿瘤细胞中低氧诱导因子-lα(HIF-lα)mRNA 的表达及血清中血管 内皮生长因子(VEGF)浓度等指标，观察丹参注射液是否对实体肿瘤有改善血供， 提高氧压，减少乏氧细胞的作用，从而提高 5-FU 对实体肿瘤的抑瘤率及诱导细 胞凋亡，增强化疗效果。 方法： ⑴造模：将传代 14 天的 Lewis 肺癌瘤源小鼠瘤组织制成的瘤细胞悬液，接种于 60 只体重 16-18 克健康雌性 C57BL/6 小鼠右下肢皮下。 ⑵分组：随机分为 6 组，每组 10 只。即模型组，丹参低剂量组（简称丹低组）， 丹参高剂量组（简称丹高组），5-FU 组，丹参低剂量+5-FU 组（简称丹低+5-FU 组），丹参高剂量+5-FU 组（简称丹高+5-FU 组）。 ⑶给药剂量及时间：各组于接种第 2 日起每天腹腔注射给药 0.2ml/只，连续 10 天。 ⑷取样及检测指标：末次给药 24 小时后摘眼球取血检测血常规、血管内皮生长 因子浓度；剥取瘤体测量各组瘤体重量、计算抑瘤率；检测肿瘤细胞 HIF-lα mRNA 表达值；镜下观察各组瘤体微血管密度、细胞凋亡及主要器官转移灶数目。 结果： 1.5-FU 组、丹高+5-FU 组与模型组相比 HIF-lα mRNA 的表达值降低（P﹤0.01）， 且丹高+5-FU 组较 5-FU 组相比，更有降低 HIF-lαmRNA 的表达值的趋势，表明 有增加乏氧细胞氧压的作用。 2.丹高组、5-FU 组、丹低+5-FU 组及丹高+5-FU 组 VEGF 浓度、瘤组织微血管密 度（MVD）与模型组比较均降低（P﹤0.05），5-FU 组、丹低+5-FU 组及丹高+5-FU 组组间虽差异无统计学意义（P﹥0.05），但丹低+5-FU 组较 5-FU 组相比，降低 二者的趋势更为明显，提示有减少微血管生成的趋势。 3.丹高组、5-FU 组、丹低+5-FU 组及丹高+5-FU 组瘤体细胞凋亡指数与模型组比 较均增高（P﹤0.05），5-FU 组、丹低+5-FU 组及丹高+5-FU 组组间虽差异无统计 学意义（P﹥0.05），但丹低+5-FU 组较 5-FU 组相比，更有降低的趋势，提示有 促进细胞凋亡增强 5-FU 疗效的作用。 4.丹低组及丹高组瘤体重量较模型相比减轻（P﹤0.05），抑瘤率分别为 21.02%、 30.75%。5-FU 组、丹低+5-FU 组和丹高+5-FU 组较模型组瘤体重量明显减轻（P ﹤0.01），抑瘤率分别为 54.06%、58.99%、62.88%。丹低+5-FU 组、丹高+5-FU 组与 5-FU 组相比抑瘤率分别为 10.73%、19.21%。实验表明丹参低剂量、丹参高 剂量与 5-FU 联用对 Lewis 肺癌小鼠均具有相加抑制作用（0.85﹤Q﹤1.15）。 5.丹高组与模型组相比白细胞数降低（p﹤0.05），而 5-FU 组、丹低+5-FU 组、 丹高+5-FU 组降低更明显（p﹤0.01）。丹低+5-FU 组较 5-FU 组有增加红细胞数、 血红蛋白含量，并有降低血小板数的趋势。 6.经给药 10 天后，丹高组见 2 处肺脏转移灶，其他主要脏器尚未发现转移。余 组各主要脏器均未见肿瘤转移灶，提示化疗同时使用丹参注射液无促进肿瘤转移 的副作用。 结论：丹参注射液联合 5-FU 可能通过降低 HIF-1α mRNA 表达值及血 VEGF 浓度 增加乏氧细胞氧压、抑制肿瘤微血管生成，从而增强 5-FU 对肿瘤的抑瘤率及诱 导细胞凋亡，且无量效依赖效应及促进肿瘤转移的副作用。 关键词：丹参注射液；Lewis肺癌；低氧诱导因子；血管内皮生长因子；细胞凋 亡 基金项目：2008 年四川省科技厅应用基础研究项目（NO.2008JY0008） Abstract To detection of tumor cells of hypoxia-inducible factor-lα (HIF-lα) mRNA expression and the concentration of vascular endothelial growth factor (VEGF) in serum, observe whether the Danshen injection has improved blood supply, increase the role of oxygen pressure,reduce the number of hypoxia cells to tumor,thus enhancing chemotherapy effect on rats. Methods: Model:The tumor