环境微生物教学课件 9酶.pptVIP

酪氨酸酶的三维结构 酶 酶是生物催化剂，酶制剂已经开始应用于三废治理 脂肪酶用于净化生活污水；多酚氧化酶用于除酚 绝大多数酶是蛋白质， 化学组成:简单酶、结合酶； 结构的不同:单体酶、聚合酶 存在位置的不同:胞内酶、胞外酶 催化反应性质的不同：水解酶、氧化还原酶、转移酶、聚合酶、异构化酶、合成酶、裂解酶、激酶等。 酶的分类—催化反应性质不同 水解酶催化底物的加速水分解反应。 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如，脂肪酶(Lipase)催化脂的水解反应： 酶的分类 氧化-还原酶催化氧化-还原反应。 主要包括脱氢酶(dehydrogenase)和氧化酶(Oxidase)。 如，乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。 酶的分类 转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。例如， 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。 酶的分类 裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。 主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。 例如， 延胡索酸水合酶催化的反应。 酶的分类 异构酶催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的重排过程。例如，6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。 酶的分类 合成酶，又称为连接酶，能够催化C-C、C-O、C-N 以及C-S 键的形成反应。这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。 A + B + ATP + H-O-H ===A ? B + ADP +Pi 例如，丙酮酸羧化酶催化的反应。 丙酮酸 + CO2 ? 草酰乙酸 酶促反应的基本概念 酶促反应的特点 与一般催化剂的共同点： 自身质量不变，少量即可发挥作用 只催化热力学允许的反应 不改变反应的平衡常数，只加快反应速度 催化反应的机理相同，都是降低反应活化能 米-门方程 米氏常数Km的意义 不同的酶具有不同Km值，它是酶的一个重要的特征物理常数。 Km值只是在固定的底物，一定的温度和pH条件下，一定的缓冲体系中测定的，不同条件下具有不同的Km值。 Km值表示酶与底物之间的亲和程度：Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低; Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。 米氏常数的求法 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax 影响酶促反应速度的因素 在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应特征。 当底物浓度达到一定值，几乎所有的酶都与底物结合后，反应速度达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。 在底物浓度足够时, 酶浓度越高，酶促反应越快。 当酶浓度很高时，酶促反应速度趋于平缓，表现为零级反应。 3. pH 的影响 在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适 pH。 4. 温度的影响 一方面是温度升高,酶促反应速度加快。 另一方面,温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最适温度。 在最适温度条件下,反应速度最大。 Q10=1.4-2.0 Q10=2-3（化学催化） 5.激活剂对酶活性的影响 使酶表现出催化活性或强化其催化活性的现象，称为酶的激活作用。 能够激活酶的活性的化合物则称为激活剂。　 6.抑制剂对酶活性的影响 使酶的活性降低或丧失的现象，称为酶的抑制作用。 能够引起酶的抑制作用的化合物则称为抑制剂。　 酶的抑制剂一般具备两个方面的特点： 1.能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。 2.在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。 1） 抑制剂-形成复合体或结合物 a. 不可逆抑制 抑制剂与酶反应中心的活性基团以共价形式结合，引起酶的永久性失活。如有机磷毒剂二异丙基氟磷酸酯。 (a) 竞争性抑制-可逆 某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竞争与酶活性中心结合。当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了。 竞争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底物的竞争能力来消除。 (b) 非竞争性抑制-不可逆 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。 底物影响酶反应速度的方程表达式——米氏方程 v——反应速度； V——最大反应速度；