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富硒链霉菌WH63的鉴定和生理活性研究-生态学专业论文.docx

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富硒链霉菌WH63的鉴定和生理活性研究-生态学专业论文

万方数据 万方数据 本论文经答辩委员会全体委员审查,确认符合安徽师范大学 硕士学位论文质量要求。 答辩委员会签名: 主席:(工作单位、职称) 委员: 导师: 学 位 论 文 独 创 性 声 明 本 人 声 明 所 呈 交 的 学 位 论 文 是 本 人 在 导 师 指 导 下 进 行 的 研 究 工 作 及 取 得 的 研 究 成 果 , 与 我 一 同 工 作 的 同 志 对 本 研 究 所 做 的 任 何 贡 献 均 已 在 论 文 中 作 了 明 确 的 说 明 并 表 示 谢 意 , 除 了 文 中 特 别 加 以 标 注 和 致 谢 的 地 方 外 , 论 文 中 不 包 含 其 他 人 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 。 学位论文作者签名: 签字日期: 年 月 日 学 位 论 文 版 权 使 用 授 权 书 本 学 位 论 文 作 者 完 全 了 解 安 徽 师 范 大 学 有 关 保 留 、使 用 学 位 论 文 的 规 定 :学 校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查 阅 和 借 阅 。本 人 授 权 安 徽 师 范 大 学 可 以 将 学 位 论 文 的 全 部 或 部 分 内 容 编 入 有 关 数 据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保 密 的 学 位 论 文 在 解 密 后 适 用 本 授 权 书 。 学位论文作者签名: 导师签名: 签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日 学 位 论 文 作 者 获 学 位 后 去 向 : 工 作 单 位 : 电 话 : 通 讯 地 址 : 邮 编 : 富硒链霉菌 WH63 的鉴定和生理活性研究 摘 要 硒(Se)是维护人体正常生命活动必不可少的微量元素之一。硒结合蛋白形成 硒蛋白是重要的抗氧化酶,可防止自由基引起的细胞损伤,调节甲状腺功能,有助 于免疫系统的正常运作。中国约有 2/3 的地区属国际上公认的缺硒地区,主要作物中 含硒量低于 0.05μg/g。本文对来自土壤中筛选出来的 15 株放线菌进行富硒筛选和促 植物生长筛选,从中挑选出一株菌并对其进行鉴定和菌株生理活性研究。 1. 链霉菌 WH63 菌株具有较强地富硒能力 对实验室保存的 15 株放线菌的富硒能力进行试验,发现平板硒浓度为 100 mg/L 时,放线菌编号为 WH63 菌株的富硒能力最好,可在此浓度生长良好。通过显微形 态学观察,WH63 菌株孢子丝波曲,孢子表面光滑;在高氏Ⅰ号平板上基内菌丝为 黄色,气生菌丝为白色,可利用 D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、 L-鼠李糖、肌醇、D-甘露醇和壳聚糖,不利用棉子糖;生理生化实验结果表明,WH63 菌株明胶液化有限,牛奶不凝固、胨化弱,不产 H2S 和黑色素,淀粉水解强,纤维 素分解弱,在无氮培养基上生长良好。结合 16SrDNA 序列分析鉴定,发现其与唐德 链霉菌(Streptomyces tendae)的同源性最高为 96.3%,且生理生化特性一致,初步 鉴定 WH63 菌株为链霉菌属。研究硒元素对 WH63 菌株生长的影响时发现,低浓度 的硒元素可以促进菌株生长,高浓度的硒元素会抑制菌株的生长,当硒添加量为 0.5 mg/L 和 1mg/L 的 WH63 菌株生物量比对照分别提高 12%和 8%;在培养 48h 时,2mg/L 的淀粉酶活力最高,为 113.3U/ml,且添加硒元素的淀粉酶均比对照高,说明硒元素 可以提高菌株产淀粉酶能力。通过菌落形态观察、结合 SEM(扫描电镜)和 IR(红 外光谱)分析,发现链霉菌 WH63 可以将无机硒转化为红色单质硒,红色单质硒附 着在富硒链霉菌 WH63 菌体表面。 2. 富硒链霉菌 WH63 发酵液对蔬菜上海青生长具有促进作用 通过用加硒高氏 1 号培养基培养链霉菌 WH63 得到的富硒发酵液对蔬菜上海青 种子进行浸种培养和盆栽,测定上海青的生长指标,来探究富硒链霉菌 WH63 发酵 液对青菜生长的影响。结果表明,当培养基中硒含量为 0.5mg/L 时,链霉菌 WH63 发酵液对青菜发芽势的促进作用最好,浸种第五天的株高较水处理对照组提高了 I %,较不含硒的发酵液处理组提高了 16.74 %;此时,青菜芽的 POD 酶活性最 强,为 0.27U/g·min;MDA 含量最低,为 7.30 μmol/g。用稀释 32 倍的富硒链霉菌 WH63 发酵液浇灌青菜植株,测定盆栽 20 天的叶片叶绿素含量最高,较水处理组和 不含硒的发酵液处理组分别提高了 13.84%和 2.55%;有机硒的转化率达到 92.42%, 相比对照提高了 18.55%。表明用链霉菌 WH63 发酵液浇灌,增强了青菜种子抗逆

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