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富硒链霉菌WH63的鉴定和生理活性研究-生态学专业论文
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富硒链霉菌 WH63 的鉴定和生理活性研究
摘 要
硒(Se)是维护人体正常生命活动必不可少的微量元素之一。硒结合蛋白形成 硒蛋白是重要的抗氧化酶,可防止自由基引起的细胞损伤,调节甲状腺功能,有助 于免疫系统的正常运作。中国约有 2/3 的地区属国际上公认的缺硒地区,主要作物中 含硒量低于 0.05μg/g。本文对来自土壤中筛选出来的 15 株放线菌进行富硒筛选和促 植物生长筛选,从中挑选出一株菌并对其进行鉴定和菌株生理活性研究。
1. 链霉菌 WH63 菌株具有较强地富硒能力
对实验室保存的 15 株放线菌的富硒能力进行试验,发现平板硒浓度为 100 mg/L 时,放线菌编号为 WH63 菌株的富硒能力最好,可在此浓度生长良好。通过显微形 态学观察,WH63 菌株孢子丝波曲,孢子表面光滑;在高氏Ⅰ号平板上基内菌丝为 黄色,气生菌丝为白色,可利用 D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、 L-鼠李糖、肌醇、D-甘露醇和壳聚糖,不利用棉子糖;生理生化实验结果表明,WH63 菌株明胶液化有限,牛奶不凝固、胨化弱,不产 H2S 和黑色素,淀粉水解强,纤维 素分解弱,在无氮培养基上生长良好。结合 16SrDNA 序列分析鉴定,发现其与唐德 链霉菌(Streptomyces tendae)的同源性最高为 96.3%,且生理生化特性一致,初步 鉴定 WH63 菌株为链霉菌属。研究硒元素对 WH63 菌株生长的影响时发现,低浓度 的硒元素可以促进菌株生长,高浓度的硒元素会抑制菌株的生长,当硒添加量为 0.5 mg/L 和 1mg/L 的 WH63 菌株生物量比对照分别提高 12%和 8%;在培养 48h 时,2mg/L 的淀粉酶活力最高,为 113.3U/ml,且添加硒元素的淀粉酶均比对照高,说明硒元素 可以提高菌株产淀粉酶能力。通过菌落形态观察、结合 SEM(扫描电镜)和 IR(红 外光谱)分析,发现链霉菌 WH63 可以将无机硒转化为红色单质硒,红色单质硒附 着在富硒链霉菌 WH63 菌体表面。
2. 富硒链霉菌 WH63 发酵液对蔬菜上海青生长具有促进作用
通过用加硒高氏 1 号培养基培养链霉菌 WH63 得到的富硒发酵液对蔬菜上海青 种子进行浸种培养和盆栽,测定上海青的生长指标,来探究富硒链霉菌 WH63 发酵 液对青菜生长的影响。结果表明,当培养基中硒含量为 0.5mg/L 时,链霉菌 WH63 发酵液对青菜发芽势的促进作用最好,浸种第五天的株高较水处理对照组提高了
I
%,较不含硒的发酵液处理组提高了 16.74 %;此时,青菜芽的 POD 酶活性最
强,为 0.27U/g·min;MDA 含量最低,为 7.30 μmol/g。用稀释 32 倍的富硒链霉菌 WH63 发酵液浇灌青菜植株,测定盆栽 20 天的叶片叶绿素含量最高,较水处理组和 不含硒的发酵液处理组分别提高了 13.84%和 2.55%;有机硒的转化率达到 92.42%, 相比对照提高了 18.55%。表明用链霉菌 WH63 发酵液浇灌,增强了青菜种子抗逆
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