风洞噪声对小鼠听性脑干反应和耳蜗超微结构的影响及雌激素的防护作用-耳鼻咽喉科学专业论文.docxVIP

个人简历 41 附录：研究生期间获奖情况、发表论文及参加会议情况 ... 42 致 谢 44 综 述 46 参考文献 52 PAGE PAGE 1 缩略词表 英文简写 英文全称 中文全称 NIHL Noise-Induced Hearing Loss 噪声性听力损失 SEM Scanning Electron Microscope 扫描电镜 ABR Auditory Brainstem Response 听性脑干反应 HC Hair cell 毛细胞 TTS Temporary Threshold Shift 暂时性阈移 PTS Permanent Threshold Shift 永久性阈移 OHC Out Hair Cell 外毛细胞 IHC Inner Hair Cell 内毛细胞 ROS Reactive Oxygen Species 活性氧 RNS Reactive Nitrogen Species 活性氮 GSH Reduced Glutathione Sodjum 谷胱甘肽 TS Turner Syndrome 特纳综合征 SOD Super Oxide Dismutase 超氧化物歧化酶 MDA Malondialdehyde 丙二醛 EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸 ERs Estrogen Receptors 雌激素受体 ATP Adenosine Trip Hosphate 三磷酸腺苷 风洞噪声对小鼠听性脑干反应和耳蜗超微结构 的影响及雌激素的防护作用 摘 要 目的 根据现场采集相关数据模拟风洞噪声，建立小鼠噪声性耳聋模型，观察风 洞噪声对小鼠听性脑干反应和耳蜗超微结构的损伤。脱离风洞噪声后给予雌激素 干预，观察雌激素对小鼠 ABR 阈值及耳蜗超微结构的作用，探讨雌激素对噪声性 听力损伤的影响，为噪声性耳聋的预防和治疗提供依据。 方法 40只昆明种小鼠（雄性）随机分为单纯噪声组（A组）、雌激素治疗组（B 组），每组20只，分别暴露于模拟风洞噪声环境中，每天8小时，连续7天。B组噪 声暴露结束后30min肌肉注射苯甲酸雌二醇0.15mg/只，而A组则不给予注射苯甲酸 雌二醇。分别于实验前、噪声暴露3天、噪声暴露7天、脱离噪声后恢复3天、脱离 噪声后恢复7天共5个时间节点测试各组小鼠听性脑干反应(ABR)阈值，并于噪声暴 露7天和脱离噪声后恢复7天时将小鼠快速断头、迅速取出耳蜗，2.5％戊二醛固定 液进行离体耳蜗灌注，并在固定液中固定4小时。(1)采用硬剥法暴露出基底膜， 然后进行脱水、干燥、镀金等处理，扫描电镜观察并拍照。(2)将标本浸入10％乙 二胺四乙酸中脱钙3周，然后进行脱水、包埋、固化、切片及染色处理，透射电镜 下观察并拍照。 结果 两组小鼠实验前 ABR 阈值无统计学差异，接触噪声后两组小鼠均有明显听 力损失，表现为阈值随噪声暴露时间延长而升高，噪声暴露 3 天、噪声暴露 7 天 的 ABR 阈值均比实验前增高，但两组组间无统计学差异。当脱离噪声后，两组听 力均有不同程度恢复，脱离噪声后恢复 3 天、脱离噪声后恢复 7 天时雌激素治疗 组 ABR 阈值较单纯噪声组低，两组间有统计学差异。 扫描电镜显示：在噪声暴露 7 天后两组小鼠耳蜗损伤严重，内、外毛细胞限 局性片状广泛缺失，Corti 器塌陷、变形。脱离噪声恢复 7 天时，单纯噪声组小 鼠耳蜗内、外毛细胞限局性点状缺失，Corti 器塌陷、皱缩、变形；而雌激素治疗 组小鼠耳蜗病变较轻，只有内毛细胞轻度散乱、融合，外毛细胞基本正常。 透射电镜显示：在噪声暴露 7 天后两组小鼠耳蜗内、外毛细胞胞浆内均有较 多空泡形成，细胞线粒体减少。脱离噪声恢复 7 天时，单纯噪声组小鼠耳蜗外毛 细胞线粒体大致正常，基本无空泡，内毛细胞虽有空泡形成，但较噪声暴露 7 天 时数量减少；雌激素治疗组小鼠耳蜗内毛细胞胞浆内仅有很少量空泡形成，外毛 细胞线粒体均正常，无空泡形成。 结论 风洞噪声能明显损伤小鼠听性脑干反应，其 ABR 阈值随噪声暴露时间延长 而升高，脱离噪声后两组均有不同程度恢复，雌激素治疗组恢复效果好于单纯噪 声组。风洞噪声同时造成小鼠耳蜗超微结构的损伤，雌激素治疗组损伤较单纯噪 声组明显减轻，与听力检查结果相吻合。雌激素对小鼠风洞噪声性耳聋具有保护 作用。 【关键词】风洞噪声； 听性脑干反应； 雌激素； 扫描电镜； 透射电镜 Effects of Wind Tunnel Noise on Mices Auditory Braintem Response and Cochlear Ultrastructure and Protection by Estrogen Abstract