镉抑制卵母细胞MI期进程中MPF的活性及其相关基因的表达-卫生毒理学专业论文.docxVIP

福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 目录 HYPERLINK \l _bookmark0 英文缩写词汇表 1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要 2 HYPERLINK \l _bookmark2 Abstract 5 HYPERLINK \l _bookmark3 正文 10 HYPERLINK \l _bookmark4 前言 10 HYPERLINK \l _bookmark16 技术路线 13 HYPERLINK \l _bookmark17 材料与方法 14 HYPERLINK \l _bookmark18 结果与分析 25 HYPERLINK \l _bookmark19 讨论 45 HYPERLINK \l _bookmark24 结论 51 HYPERLINK \l _bookmark25 参考文献 52 HYPERLINK \l _bookmark26 致谢 57 HYPERLINK \l _bookmark27 综述 58 HYPERLINK \l _bookmark28 参考文献 63 PAGE PAGE 1 英文缩写 英文缩写词汇表 英文全称 中文译名 β-actin β-actin β-肌动蛋白 Cd Cadmium 镉 Cdc25b Cell Division Cycle 25 Homolog B 细胞分裂周期 25 同源体 B Cdk1 Cyclin-dependent kinase 1 细胞周期依赖性蛋白激酶 1 COCs Cumulus oocyte complexes 卵丘卵母细胞复合物 Ccnb1 DO CyclinB1 Denuded oocyte 细胞周期蛋白 B1 裸卵 ELISA Enzyme linked immunosorbent assay HYPERLINK /wiki/%E5%85%8D%E7%96%AB%E5%90%B8%E9%99%84%E5%89%82 酶联免疫吸附剂测定 GV HYPERLINK /w/index.php?title=Germinal_vesicleamp;redirect=no Germinal vesicle 生发泡 GVBD Germinal vesicle breaking down 生发泡破裂 MI Meiosis I 减数第一次分裂 MII Meiosis II 减数第二次分裂 MPF Maturation promoting factor 成熟促进因子 OD Optical density 光密度值 PMSG Pregnant Mare Serum Gonadotropin 孕马血清促性腺激素 Real time-PCR Realtime-polymerase Chain reaction 实时定量聚合酶链反应 SDS SDS-polyacrylamidegelelectrophoresis SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳 Western-blot Western-blot 免疫蛋白印迹 镉抑制卵母细胞 MI 期进程中 MPF 的活性及其相关基因的表达 中文摘要 目的 通过观察卵母细胞 MI 期即 GV 期至第一极体释放进程中，不同剂量镉暴露卵 母细胞不同时间后，卵母细胞成熟促进因子（MPF）活性及其相关基因—Cdk1、 Ccnb1、Cdc25b 的变化，探讨镉是否通过改变 MPF 相关基因的表达调节 MPF 的 活性，进而影响卵母细胞 MI 期的进程。 方法 28 日龄的清洁级 ICR 雌性小鼠腹腔注射 PMSG 10 IU/只，48 小时后处死，取 生发泡期卵母细胞于体外暴露镉 0 h、6 h、9 h，镉暴露剂量分别为 0 μM、0.05 μM、 0.5 μM、2.5 μM、5 μM；用体视显微镜分别观察 0 h、6 h、9 h 各剂量组卵母细胞 的形态学变化；分别收集 0 h、6 h、9 h 各剂量组的卵母细胞，采用 ELISA 法检测 卵母细胞 MPF 活性；采用 Real time-PCR 方法和 Western-blot 法检测各暴露时间点、 各剂量组卵母细胞的 Cdk1、Ccnb1、Cdc25b 的 mRNA 及蛋白表达情况。 结果 1、镉暴露小鼠卵母细胞 MI 期进程中不同暴露剂量、不同暴露时间点的细胞 形态观察：0 h Cd 组每个卵母细胞均可见清晰的细胞核，核大，外包完整的细胞膜， 卵母细胞外包裹着层透明带，此时的卵母细胞即为 GV（ HYPERLINK /w/index.php?title=Germinal_vesicleamp;redirect=no Germinal vesicle）期的卵 母细胞。对照组卵母细胞体外培养