环境化学元素与出生缺陷关联的生态学研究及其致病机制探讨-流行病与卫生统计学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 BD 英文名称 Birth defect 中文名称 出生缺陷 GIS km2 Geographic Information System Square kilometer 地理信息系统 平方千米 mL Milliliter 毫升 L Liter 升 g Gram 克 μg Microgram 微克 h Hour 小时 min Minute 分钟 rpm/min Rotation per minute 转/分 D Day 天 PBS Phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 Cr(Ⅵ) Hexavalent chromium 六价铬 Cr(Ⅲ) Trivalent chromium 三价铬 SD Sprague Dawley SD 大鼠 GD Gestation Day 妊娠天数 SOD Superoxide Dismutase 超氧化物歧化酶 MDA Malondialdehyde 丙二醛 GSH Glutathione 谷胱甘肽 ROS Reactive oxygen species 活性氧族 OD Optical density 吸光度 1 环境化学元素与出生缺陷关联的生态学研究及 其致病机制探讨 摘要 目的： 1. 利用重庆市 0～5 岁儿童出生缺陷发生率与表层土壤化学元素 含量的空间分布专题地图，探讨出生缺陷发生率与土壤化学元素含量 的相关性，为筛选出生缺陷致病因子及其防制提供科学依据。 2. 探讨六价铬的胚胎毒性作用及其氧化应激和凋亡发生机制在大 鼠胎盘组织损伤中的作用。 方法： 1.（1）出生缺陷患病率资料：出生缺陷患病率资料来自出生缺陷 基线调查。采取多阶段按比例分层整群混合抽样方法确定 96 个调查 点，对抽取调查点全部 0～5 岁常住（居住时间 ≥ 3 个月）儿童进 行出生缺陷患病情况调查，对出生后死亡、死胎、死产、病理性引产 者采取回顾性调查方式收集资料。 （2）土壤化学元素含量资料：参照中国地质调查局多目标地球化 学 调 查 规 范 ， 采 用 国 家 地 质 分 析 中 心 的 电 感 耦 合 等 离 子 体 质 谱 （ ICP-MS ）检测土壤样品中铜（ Cu ）、锌（ Zn ）、碘（ I ）、硒 （ Se ）、铅（ Pb ）、砷（ As ）、镉（ Cd ）、铬（ Cr ）、氟（ F ）、 汞（ Hg ）、镍（ Ni ） 11 种化学元素含量水平。 2 （3）样本分析点的确定：土壤化学元素含量数据是本课题组与重 庆市地勘局合作测得。以乡镇（街道）为单位，选取以人群为基础的 出生缺陷基线调查点和地质勘探局测定点中抽中的乡镇（街道）作为 样本点，共计 33 个。 （4）专题地图绘制：利用 MapInfo 7.0 软件绘制出生缺陷患病率 专题地图和土壤元素含量专题地图。根据出生缺陷患病率专题地图中 极端值与土壤元素含量专题地图中极端值的对应关系，寻找有关联的 影响因素。 2. 建模：雌雄 SD 大鼠按 2 : 1 合笼饲养，次日检查阴栓或用棉 签阴道涂片检查精子，查见阴栓或精子之日记为孕第 0 天( GD0 )。将 交配成功的大鼠按体重随机分为 4 组( A，B，C，D )。灌胃剂量： 65mg/kg。灌胃量按 1mL/100g 算，每天灌胃一次。A 组(对照组)：孕 （ 1～20 d ）灌胃三蒸水，B 组（孕早期）：孕（ 1～10 d ）灌胃重 铬酸钾液，C 组（孕器官形成期）：孕（ 7～16 d ）灌胃重铬酸钾液； D 组（孕中后期）：孕( 11～20 d )灌胃重铬酸钾液，实验各组其余孕期 灌胃三蒸水。GD20 用 10% 水合氯醛麻醉，股动脉取血，剖腹取出胎 鼠、胎盘，观察其外观，测定各组胎鼠体重、身长、尾长和大鼠胎盘 重，将各组胎鼠标本各取一半分别用 Bouins 液固定和茜素红 S 染 色，作内脏和骨骼畸形检查用。胎盘和全血标本保存于 －80℃ 冰箱 备用。用石墨炉原子吸收法测定母鼠全血和胎盘组织中铬含量。722 型 分光光度计用于测定各组孕鼠胎盘组织超氧化物歧化酶（ SOD ）活 力、丙二醛（ MDA ）含量、谷胱甘肽（ GSH ）的含量。Western-blotting 3 法用于检测大鼠胎盘组织中凋亡蛋白 Bax 水平。 3.统计学分析：用 EpiDate 3.02 软件建立数据库。采用统计软件 SAS 8.0 进行分析，分析方法包括主成分、相关性、单因素方差分析和 Kruskal-Wallis H 检验等，两两比较采用 Dunnett-t 检验。 P 0.05 视 为差异有统计学意义。 结果： 1.出生缺陷发生率空间分布专题地图与土壤化学元素铜（