康莱特对uvb照射后人皮肤成纤细胞mmp1四,mmp3的表达影响.docxVIP

中文摘要目的：本研究通过观察中药薏苡仁提取物康莱特(KLT)对中波紫91线(ultraviolet 中文摘要 目的：本研究通过观察中药薏苡仁提取物康莱特(KLT)对中波紫91线(ultraviolet B，UVB)照射的体外培养人皮肤成纤维细胞的基质金属蛋白酶1、3(Matrix Metallo ProteinaSes，MMPl、MMP 3)mRNA及蛋白表达的影响，进一步探讨康 莱特(KLT)是否抗光老化的药理作用。 方法：采用酶消化法和组织块法培养人皮肤成纤维细胞；MTT法检测康莱特对 人皮肤成纤维细胞增殖的影响；用不同辐照剂量UVB照射细胞后用实时荧光定 量技术(ImPCR)检测MMPl，MMP3 mRNA表达，酶联免疫吸附试验(ELISA) 法检测MMPl，MMP3蛋白水平；30 mJ／cm2 UVB照射细胞后分组分别加入1、 2．5、51aL／mL康莱特基质及康莱特，用同上方法检测MMPI，MMP3 mRNA及蛋 白水平。 结果：人皮肤成纤维细胞倍增时间较短，o．1d为潜伏期，1．3 d为细胞增殖期， 3—5 d为对数生长期而5．7 d为平台期。第6代之后细胞逐渐失去活力，生长缓 慢，形态不规则。经MTT法检测加入不同浓度的康莱特细胞组结果显示与未加 康莱特组比较，差异无统计学意义(pO．05)。30 mJ／cm2 UVB照射细胞组的 MMPl，MMP3 mRNA及蛋白表达水平与无UVB照射组的差异有统计学意义 (p0．05)。30 mJ／cm2 UVB照射细胞组加入不同浓度基质及康莱特MMPl， MMP3 mRNA及蛋白表达水平与对照组的差异有统计学意义(p0．05)。 结论：人成纤维细胞可在较短时间内获得，第2代到第5代细胞增殖能力较强 且生长稳定，宜用于实验。康莱特对人皮肤成纤维细胞的增殖无影响。康莱特 可有效降低UVB照射后的人皮肤成纤维细胞MMPl，MMP3 mRNA及蛋白的表 达，且有剂量．效应关系。所以我们推测其有抗光老化的药理作用。 关键词：薏苡仁基质金属蛋白酶成纤维细胞光老化实时荧光定量酶联免 疫吸附试验 天津医科大学硕士学位论文 天津医科大学硕士学位论文 Abstract Ob j ect i ve：To investigated the expression of matrix metallo proteinase 1，3 (MMP 1，MMP3)of human skin fibroblasts induced by UVB radiation，and to explore the protective effect of KLT on the expression of matrix metallo proteinase 1，3 (MMP 1，MMP3)of human skin fibroblasts induced by UVB radiation． Methods：Hunman skin fibroblasts were cultured and grouped．MTT were performed to detected the effect of KLT on the proliferation of fibroblasts．Then， assessed the effects of KLT treatment on mRNA and protein expressions of MMPl， MMP3 in UVB radiated fibroblasts． Resu I ts：Fibroblasts cells could proliferate in a short time．3-5 days is logarithmic growth period of fibroblasts and 5-7 days is a platform period．After the sixth generation，the cells gradually lose energy and shown an irregular shape．KLT exhibited no inhibitory effect on the proliferation of fibroblasts．The expression of MMPl，MMP3 mRNA and protein in different dose UVB radiated fibroblasts expressed significant difference(p0．05)，especially in 30 mJ／cm2 UVB group．KLT treatment exhibited down-regulation on