整合素茁1对泡沫细胞形成的影响及其机制-中国动脉硬化杂志.PDF

28 ISSN 1007鄄3949 Chin J Arterioscler,Vol21,No 1,2013 ·实验研究 · [文章编号]摇 1007鄄3949(2013)21鄄01鄄0028鄄04 整合素 茁1对泡沫细胞形成的影响及其机制 1,2 1 1 1 郝 菲 ,陶建 ,刘 雅 ,李晓辉 (1.第三军医大学药学院药剂教研室,重庆市400038;2.解放军161 医院药械科,湖北省武汉市430014) [关键词]摇 整合素茁1;摇 泡沫细胞;摇 CD36;摇 小凹 [摘摇 要]摇 目的摇 探讨整合素茁1对泡沫细胞形成的影响并初步阐明其作用机制。 方法摇 针对整合素茁1基因设 计并化学合成siRNA。 RAW264郾7 细胞与含0郾1g/ Lox鄄LDL的培养基培养,分为空白对照组、转染siRNA 阴性对照 组(siRNANC)和siRNA组。 应用油红O染色观察泡沫细胞形成,胆固醇氧化酶终点法测定细胞内总胆固醇的含 量,原子力显微镜观察细胞膜上小凹结构的变化,Western blot和实时荧光定量PCR检测清道夫受体CD36蛋白和 mRNA的表达。 结果摇 与空白对照组相比,siRNA组油红O染色阳性细胞数明显减少,细胞内总胆固醇/ 总蛋白显 著降低(P0郾01)。 原子力显微镜下,siRNA 干扰整合素 茁1基因后细胞未见明显的小凹结构。 Western blot及荧 光定量PCR结果显示siRNA组CD36蛋白和mRNA表达均显著减少(P0郾01)。 结论摇 沉默整合素茁1基因能有 效减少RAW264郾7 细胞对ox鄄LDL的摄取,抑制泡沫细胞的形成,其机制可能与降低清道夫受体CD36 的表达和减 少细胞膜表面的小凹相关。 [中图分类号]摇 R363 [文献标识码]摇 A Effect of Integrin 茁1onFormationof Foam Cells andItsMechanisms 1,2 1 1 1 HAO Fei ,TAOJian ,LIU Ya ,and LI Xiao鄄Hui (1.Institute of MateriaMedica andDepartment of Pharmaceutics,College of Pharmacy,ThirdMilitary Medical University, Chongqing 400038, China; 2. Department of Medicament and Instrument, No. 161 Hospital of PLA, Wuhan, Hubei 430014,China) [KEY WORDS]摇 Foam Cells;摇 Integrin 茁1;摇 CD36;摇 Caveolae [ABSTRACT]摇 摇 Aim摇 To investigate the effect of integrin 茁1on foam cells formation by RNA interference (RNAi)鄄 mediated silencing.摇 摇 Methods摇 Short hairpin RNAsagainst mouseintegrin 茁1wasconstructed.摇 Thefoamcellforma鄄 tion induced byoxidizedlowdensitylipoprotein (ox鄄LDL)wasanalyzedinmouseRAW264郾7 cellswhichweredividedinto three groups,includingcontrolgroup,siRNANCgroup (withtransfectio