模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察.PDFVIP

第+ 卷第!( 期 第* 三* 军* 医* 大* 学* 学* 报 d28G + ，L2G !( * * !$)% ’ 年) 月 HXPH* HXHC9VIH9* V9CIXILH9* VIBIPHFI:* P9FPIH9* * :-RG ’ 论著 文章编号：!#$%% （’ ）!( # !$)% #% 模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察 !， ! ! ! ! 刘卫生 ，王英杰 ，刘* 涛 ，张世昌* * （第三军医大学西南医院全军感染病研究所，重庆%+’ ；延安大学附属医院心 血管内科，陕西 延安( !, ） * * 摘* 要：目的* 研究模拟微重力条件下小鼠胚胎干细胞（-./012345 67-. 5-88 ，9:5 ）拟胚体（-./0124; /2;4-6 ，96 ）的 形成及分化。方法* 胰酶消化普通培养的小鼠胚胎干细胞，调整细胞数为! = !, ·.8 ! ，移入可模拟微重力的旋转型生 物反应器内进行培养，显微镜动态观察鼠96 的形成，苏木精#伊红染色观察9:5 的组织细胞分化情况，检测培养过程中 乳酸脱氢酶（8?57?7- ;-@1;02A-3?6- ，BCD ）的漏出量。取不同时相的96 ，接种, 孔培养板培养+ E $ ; ，倒置相差显微镜观 察96 来源细胞的分化。结果* 生物反应器旋转培养% @ 即可肉眼观察到大量多细胞聚集体形成，相差显微镜和立体显 ( @ 后细胞聚集体进一步形成均一的96 。随培养时间延长96 体积不断增大，并不断有新的96 出现。 微镜下发现， D9 染色显示，96 中的9:5 呈现多组织多细胞分化特征，培养后期（! ; 以后）较大96 中心有不同程度的坏死，伴BCD 漏出量的明显升高。接种96 于, 孔培养板后，镜下观察到不同类型的细胞，如内皮样细胞、成纤维样细胞、肝细胞样细 胞、血管样结构以及可自发性搏动的心肌样细胞。结论* 9:5 在模拟微重力条件下可大量快速形成96 ，伴有不同类型的 组织细胞分化。旋转型生物反应器可作为9:5 研究的有用工具。 * * 关键词：胚胎干细胞；拟胚体；分化；生物反应器；微重力 * * 中图法分类号：F+)#++ ；F+) G !；F++) G $* * * 文献标识码：H !# $%’()*%+ (+, ,*$$##+)*()*%+ %$ ’%-.# #’/0%*, /%,*#. -+,# .*’-1()*+2 ’*3 4%2(5*)0 BIJ K-4#6@-3A!， ，KHLM N43A#O4-! ，BIJ P?2! ，QDHLM :@4#5@?3A! ! （C-R?07.-37 2S I3S-5742T6 C46-?6-6 ，:2T7@U-67 D26R47?8 ， P@40; V4847?01 V-;45?8 J34W-06471 ，X@23AY43A %+’ ，C-R?07.-37 2S X?0;4282A1 ，P@- HSS484?7-; D2