胰岛素激活PI_3K-AKT通路而促进H9c2心肌细胞葡萄糖摄取.docVIP

胰岛素激活PI3K-AKT通路而促进H9c2心肌细胞葡萄糖摄取 叶 林1，陆 凯2，张冬颖2，覃 数2 (1：400016重庆，HYPERLINK 4:1012/CSTJ/%20javascript:JGSearch(重庆医科大学附属第一医院心血管内科);重庆医科大学附属第一医院重症医学科 2：400016重庆，HYPERLINK 4:1012/CSTJ/%20javascript:JGSearch(重庆医科大学附属第一医院心血管内科);重庆医科大学附属第一医院心血管内科) [通信作者] 覃 数，E-mail：HYPERLINK mailto:Qinshu@21Qinshu@21 [摘要] 目的：探索胰岛素(Insulin)对H9c2心肌细胞葡萄糖摄取的影响及其与PI3K-AKT信号通路的关系。方法：采用不同时间及不同浓度的胰岛素处理H9c2心肌细胞，确定胰岛素处理H9c2细胞的最佳浓度和最适时间。本实验分为以下五组：正常对照组(NC组)，Insulin组(Insulin组)，Insulin+PI3K-AKT通路抑制剂LY294002组(LY294002组)，Insulin+p38MAPK通路抑制剂BIRB796组(BIRB796组)，运用荧光标记2-脱氧葡萄糖 (2-NBDG)检测H9c2心肌细胞葡萄糖摄取能力，通过荧光酶标仪、流式细胞仪检测心肌细胞葡萄糖摄取变化。使用间接免疫荧光法及激光共聚焦成像检测H9c2心肌细胞GLUT-1及GLUT-4的表达。结果：(1)： 2-NBDG可用于检测H9c2心肌细胞葡萄糖摄取能力。(2)：Insulin处理H9c2心肌细胞最适浓度和时间分别为200μmol/L和30min。(3)：流式细胞仪结果示： Insulin组与对照组相比增加H9c2心肌细胞葡萄糖摄取 (p＜0.05)；LY294002组与Insulin组相比降低心肌细胞葡萄糖摄取，两组间差异明显(p＜0.05)，BIRB796组较Insulin组无统计学差异(p＞0.05)，提示LY294002可抑制Insulin促进心肌细胞葡萄糖摄取，而BIRB796不能抑制上述作用。(4)：本实验证实H9c2心肌细胞膜表达葡萄糖转运体1(GLUT1)和葡萄糖转运体4(GLUT4)，Insulin处理H9c2心肌细胞30min后经激光共聚焦成像显示H9c2心肌细胞膜GLUT1和GLUT4表达增加(p＜0.05)。结论：胰岛素促进H9c2心肌细胞葡萄糖摄取的作用可能与PI3K-AKT通路相关，与p38MAPK通路不相关，胰岛素激活PI3K-AKT信号通路后可能促进H9c2心肌细胞膜上GLUT-1及GLUT-4的表达，从而使H9c2心肌细胞对葡萄糖摄取增加。 [关键词]：胰岛素；2-NBDG；H9c2心肌细胞；葡萄糖摄取；PI3K-AKT；p38MAPK；GLUT1和GLUT4。 HYPERLINK /pubmed/?term=Jaimovich%20E%5BAuthor%5Dcauthor=truecauthor_uid Insulin?Increases Myocardial Glucose Uptake via PI3K-AKT Pathway in H9c2?myocardial cells Ye Lin1，Lu Kai2，Zhang Dongying2，Qin Shu2 （1：Department of Intensive Care Unit,First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing,400016,China. 2：Department of Cardiology,First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing,400016,China) [Abstract]Objective: To study the effects and mechanisms of insulin on glucose uptake in H9c2 cells. Method: Use the?fluorescence microplate reader to?find the optimal concentration?and time of?insulin in?H9c2 cells.?H9c2 cells were divided to five groups:?normal?control?group, 2-NBDG group, insulin?group, LY294002 group and BIRB796 group. Used 2