细胞壁中过氧化物酶的分布对杨树木质化过程的影响.PDFVIP

维普资讯 第 26卷 第 1期 电 子 显 微 学 报 V01．26．No．1 2007年 2月 JournalofChineseElectron1VficroscopySociety 2OO7．02 文章编号 ：1000-6281(2007)01-0049-06 细胞壁中过氧化物酶的分布对杨树木质化过程的影响 殷亚方，姜笑梅 (中国林业科学研究院木材工业研究所 ，北京 100091) 摘 要 ：本文通过二氨基联苯胺 (DAB)细胞化学染 色方法 ，利用透射 电镜 (TEM)，研究毛 白杨 (Populustomentosa Cart．)木质部细胞分化过程 中过氧化物酶 (POD)在细胞壁上的分布 ，并讨论 了POD的分布位置与木质素沉积之间 的关系。形成层细胞阶段和伸展生长阶段，POD主要分布在径壁上，尤其是细胞壁角隅处和初生纹孔场附近的细 胞壁。在次生壁 s．层的沉积开始后 ，胞问层的POD反应强烈。随后 ，POD的分布 由胞间层的角隅处向s。层快速推 进 。但整个过程 中，POD活性的增加并不是 由胞 闯层依次向次生壁各层推进。与木质化过程 的比较结果表 明，POD 参与了细胞壁的木质化过程 ，但次生壁 中木质素的沉积位置并不与POD活性位置一一对应。这说明不 同时期和不 同位置分布的POD是具有不同功能的同工酶组份，不能将细胞壁上木质素的沉积位置与POD的分布简单地对应。 关键词 ：毛白杨 ；木质部细胞 ；木质化 ；过氧化物醇 中圈分类号 is792．117；Q944．6；Q554 ．6；Q336 文献标识码 ：A 过氧化物酶 (peroxidase，PoD)在植物细胞 、组织 距地面 1．3m处凿取包括韧皮部 、形成层和木质部 和器官发生、分化成熟过程 中具有重要作用，特别是 的组织块 ，并立 即用单面刀片取下包括形成层及其 POD参与了细胞壁上多聚化木质素前体的生物合成 相邻木质部和韧皮部组织 的若干小块 ，迅速投入 过程…。已有的组织化学分析显示 ，树木形成层细 0．2mol／L磷酸缓冲液 (pH7．2)配制的 2．5％的戊二 胞中POD同工酶 的活性与形成层 的活动周期为正 醛和3．7％的多聚甲醛混合 固定液 中。低真空 固定 相关关系 ，同时表 明POD在未成熟木质部细胞的分 30min后，用双面刀片将材料切成边长 1lnln一2lnln 化过程中起着重要作用 。J。而对其它植物 的组织 方块 ，换人新鲜的固定液中，低真空 固定 1h，再于常 和细胞化学研究表 明，POD的位置与细胞壁木质化 压下固定 2．5h。 区域之间确实存在一定的正相关性 ，但 POD的活性 配制Tris-HCL缓冲液和 POD培育液 ，将实验材 与细胞壁木质 化之 间可 能不是 简单 的对应 关 料参照 POD的二氨基联苯胺 (DAB)细胞化学定位 系 。因此 ，树木木质化过程中POD的作用还需 方法处理 。Tris—HCL缓冲液洗涤 4次后 ，材料切 要在细胞水平上进一步揭示。 至厚度小于 100．／tm，并在 23℃条件下POD培育液中 本实验以我国的乡土树种——阔叶树种毛 白杨 孵育20min，注意 POD培育液在临用前每 8IIll加入 (PopulustomentosaCart．)为研究对象，采用二氨基联 2ml的0．1％H2O：。用 1％的锇酸后 固定 ，4~C过夜 ； 苯胺 (DAB)细胞化学定位方法，用透射 电镜 (TEM) Spurr树脂渗透包埋。在进行对照样品处理时 ，POD 观察 了次生木质部细胞分化过程 中 POD在细胞壁 培育液中不