阿朴酯和斑螯黄复合对蛋鸡抗氧化功能、蛋品质和蛋黄色素沉积的影响.docx

阿朴酯和斑螯黄复合对蛋鸡抗氧化功能、蛋品质和蛋黄色素沉积的影响 摘要：选取54周龄海兰褐蛋鸡270只，随机分为3组，每组6个重复，每个重复15只鸡。对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别饲喂添加5.0 mg/kg阿朴酯+2.5 mg/kg斑蝥黄、5.0 mg/kg阿朴酯+5.0 mg/kg斑蝥黄的试验日粮。结果表明，与对照组相比，试验Ⅰ组蛋鸡肝丙二醛含量显著下降（P 　　1.2 饲养管理 蛋鸡采用三层阶梯式笼养，饲养期间自由采食、自由饮水，按蛋鸡的常规饲养管理规范调节环境条件、接种疫苗、给药等工作。 1.3 指标测定 1.3.1 鲜蛋品质 于正式试验第5、12、18、36 d，从各组每个重复中随机选3个鸡蛋，用比色扇测定蛋黄颜色，用CR-10型色差仪测定蛋黄颜色（亮度、红度、黄度），使用EMT-5200型多功能蛋品测定仪检测蛋白高度和哈夫单位。 1.3.2 色素含量 于正式试验第5、12、18、36 d，从各组每个重复中随机选取1个鸡蛋来测定蛋黄中的叶黄素和斑蝥黄含量。蛋黄中的叶黄素和斑蝥黄含量的测定参考GB/T 21517-2008。 1）叶黄素和斑蝥黄标品的测定。称取试样0.050 0 g于50 mL棕色容量瓶中，加入15 mL提取剂，超声振荡2 min；加入15 mL正己烷，手摇15 s，用10%无水硫酸钠水溶液定容至刻度，摇荡1 min，避光静置15 min；吸取上层溶液约1 mL，用0.45 μm滤膜过滤后待测。用公式X=（A474 nm×625）/（236×G）来计算叶黄素标准品含量（mg/kg），其中G=试样重（kg），625为稀释倍数，下同。 称取试样0.020 0 g于50 mL棕色容量瓶中，加入约1.5 mL 10%的无水硫酸钠溶液，超声波清洗仪振荡5 min；加入15 mL提取剂，超声振荡2 min；加入15 mL正己烷，手摇15 s，用10%无水硫酸钠水溶液定容至刻度，用力摇1 min，避光静置15 min；吸取上层溶液约1 mL，用0.45 μm滤膜过滤后待测，计算斑蝥黄标准品含量。 2）蛋黄中叶黄素和斑蝥黄的测定。称取样品（蛋黄）2.000 g于100 mL棕色容量瓶中，加入约3 mL 10%的无水硫酸钠溶液，超声波清洗仪振荡5 min；加入30 mL提取剂，再加入2 mL 40%的甲醇溶液，塞上塞子手摇30 s；瓶口装冷凝管，并开冷凝水，放入调好的56 ℃恒温水浴锅中，皂化20 min，取出用自来水冷却至室温；加入30 mL正己烷，手摇30 s，用10%无水硫酸钠水溶液定容至刻度，摇荡1 min，避光静置2 h；吸取上层溶液约1 mL，用0.45 μm滤膜过滤后待测，计算蛋黄中的叶黄素和斑蝥黄的含量（mg/kg）。 3）HPLC条件。固定相：正相硅胶柱4.6 mm×250 mm；流动相：正己烷∶丙酮=8∶2（注：色谱纯）；柱温：室温；流速：1.5 mL/min；检测波长：446 nm（叶黄素）、470 nm（斑蝥黄）；进样量：20 μL。 1.3.3 抗氧化性能 于试验第36天，各组每重复选取1只体重相近的母鸡，颈静脉采血收集于干净的离心管中。然后立即解剖，收集肝脏于-20 ℃储存。将采集到的血液以3 500 r/min离心15 min，分离并收集上层血清于-20 ℃保存待测。肝脏用预冷的无菌生理盐水以1∶9（m∶V）在冰水浴中匀浆，随后以4 000 r/min离心10 min，收集上清液置于-20 ℃待相关指标检测。血清和肝脏中丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量、总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）酶活测定均采用试剂盒（购于南京建成生物工程研究所），测定方法均按照试剂盒说明书进行。 1.4 数据统计 数据用SPSS 20软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），用Duncan氏法进行多重比较，以P0.05）。试验组对血清全部和肝脏其他抗氧化指标均无显著影响（P0.05）。 2.2 阿朴酯和斑蝥黄复合对蛋品质的影响 由表4知，与对照组相比，两试验组蛋黄罗氏比色扇值（RCF）极显著升高（P 　　蛋黄色素沉积可分为2个明显的阶段，黄色类胡萝卜素对第一个黄色浸润阶段较为重要，红色类胡萝卜素对第二个阶段即着色阶段影响更大，将红色和黄色类胡萝卜素结合使用效果比较好[3]。黄小春等[17]在玉米型日粮中添加不同剂量的叶黄素可显著降低蛋鸡蛋黄亮度值，并提高红度值，但对黄度值无影响。此外，李士平[18]研究报道，小麦型基础日粮中添加红辣椒提取物（一种红色素）后，蛋鸡蛋黄红度值显著提高，亮度值显著降低，黄度值有所升高但不显著。本研究结果表明，小麦型基础日粮中添加阿朴酯和斑蝥黄复合显著提高了蛋鸡蛋黄红度和黄度值，显著降低其亮度值