实验四鞭毛染色和身藻类的观察.pptVIP

实验四：鞭毛染色和藻细胞的观察 目的要求 1、学习并初步掌握鞭毛染色法；观察细菌鞭毛的形态特征；观察细菌的运动性。 鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。 细菌的鞭毛很纤细，所以，除了很少数能形成鞭毛束的细菌可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察。 要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，但其基本原理类似，即在染色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色，显微镜观察。 ．鞭毛染色法： （1） 制片： 菌种斜面的冷凝水处，取一环菌 → 将载片倾斜→ 从带有菌液的菌环上滴下一滴无菌水→让水自然流下,切勿涂抹→自然风干→ 固定。 （2） 硝酸银染色： A染液染色3-5分钟→蒸馏水洗→ 再用B染液冲洗残水→ 然后使B液充满载片→ 微热至冒气，30-60秒→水洗、吸干→ 镜检. 美蓝染色法 A染液染色8分钟，蒸馏水冲洗30秒，吸干 美蓝染色6分钟，蒸馏水冲洗20秒 pH2.0HCl冲洗至洗液变蓝 蒸馏水冲洗20秒，吸干、镜检。 实验报告及思考题 1. 绘图表示芽孢、荚膜和鞭毛的染色结果。 2. 鞭毛的染色与其他染色有何不同，为什么？ 藻细胞的观察 微囊藻、硅藻和绿藻等藻类是引起太湖水华的主要藻种。 铜绿微囊藻 栅藻 柯式并联藻 直链藻 铜绿微囊藻 蓝藻门——蓝藻纲——色球藻目——微囊藻科——微囊藻属——铜绿微囊藻 细胞球形，直径在3-7μm，细胞有伪空胞，细胞分为有光合色素的色质区和中央的无色的中心质区，中心质区有DNA微丝。 细胞中常具有大小不等的强反光颗粒，如多磷酸体，多面体（羧化酶体），蓝藻体（天门冬氨酸和精氨酸聚合体的结晶，又称结构颗粒），多聚糖体（又称蓝藻淀粉或糖原）等。 观察要求： 画图 分清色素区和 中心区伪空胞 栅藻 绿藻门——绿藻纲——绿球藻目——真集结体亚目——栅藻科——栅藻属——二形栅藻 一般是4个细胞的定形群体，有1个蛋白核。群体细胞是以长轴互相平行排列成1行。色素体周生，中间两个细胞为纺锤形，两侧的细胞弯曲为新月状。 观察要求： 画图 蛋白核 色素体 柯式并联藻 绿藻门——绿藻纲——绿球藻目——非集结体亚目——卵囊藻科——并联藻属——柯式并联藻 细胞长纺锤形，直或弯曲两端渐细，色素体周生（围绕细胞壁）、片状，以叶绿素a和b最多，还有叶黄素和胡萝卜素，故呈绿色，具有两个蛋白核；贮藏的营养物质主要为淀粉和油类，形成淀粉粒。细胞内有1个或多个细胞核。群体聚集在透明的胶被内，细胞长轴与群体长轴平行 观察要求： 画图 淀粉粒 胶被 色素体 直链藻 硅藻门——中心纲——圆筛藻目——圆筛藻科——直链藻属——变异直链藻 细胞连成链状在同一胶质管中，壳体和细胞呈圆柱状，色素体呈小圆盘状，多个。细胞间有沟状的缢入部，为“假环沟” 观察要求： 画图 色素体 假环沟 壳体 * * 鞭毛染色 实验书： P76——实验13 银染法观察鞭毛 细菌运动性观察鞭毛 细菌的特殊结构染色 鞭毛 普通变形杆菌(Proteus vulgaris) 银 染 结 果 美蓝染色结果 改良的Leifson氏染色法 制片 每一区放一滴菌液,玻片倾斜,让菌液流到小区的另一端,用 滤纸吸去多余的菌液,室温自然干燥. 染色 加染液覆盖菌面,几分钟后,涂另一区确定最佳时间,染料表 面出现金色膜时,直接用水冲洗,染色约10分钟.自然干燥后观察. 菌体鞭毛红色