食品中单核细胞增生李斯特氏建菌及其检验.pptVIP

 第三节 单核细胞增生李斯特氏菌及其检验 主要内容： 一、生物学特性 二、流行病学 三、检验 四、控制 李斯特氏菌属 李斯特氏菌属包括七个种： 单核细胞增生李斯特氏菌 、绵羊李斯特氏菌 、英诺克李斯特氏菌 、威尔斯李斯特氏菌 、西尔李斯特氏菌 、格氏李斯特氏菌 、默氏李斯特氏菌。 其中单核细胞增生李斯特氏菌对人类致病性强，绵羊李斯特氏菌对人类也有一定的致病性，其余李斯特氏菌无致病性。 单核细胞增生李斯特氏菌 单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。 它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表现为败血症、 脑膜炎和单核细胞增多。 它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，在食品卫生微生物检验中，必须加以重视。 全身传染 毒血症：病原菌在入侵的局部生长繁殖，细菌不侵入血流，只是其产生的毒素侵入血流引起全身性状．白喉、破伤风 菌血症：病原菌入侵机体后进入血流，但不在血流中繁殖，如伤寒、流行性脑脊髓膜炎的早期有菌血症期. 脓毒血症:病原性球菌引起的败血症.由于病原菌随血流播散,在全身多种组织或脏器(肝肺肾皮下等)引起多发性化脓病灶.如金黄葡萄球菌导致的脓毒血症. 败血症:是球菌、杆菌等侵入血液中并在其中生长繁殖产生毒素和其他代谢产物所引起的急性全身性感染。症状是寒战、高热、皮疹、关节痛及肝脾肿大，部分有感染性休克和迁徙性病灶。 一、生物学特性 1、形态与染色 革兰氏阳性短杆菌，大小为0.4~0.5×0.5~2μm，在有些培养基中稍弯，多数菌体一端较大，似棒状，细胞常呈V字形排列，在较老的或生长不良的培养物中，可能形成丝状。 20-25℃以4根周生鞭毛运动，在37℃只有较少的鞭毛或1根鞭毛； 无芽孢。在血清葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖荚膜。 一、生物学特性 2、培养特性 该菌营养要求不高，在20--25℃培养有动力，穿刺培养2－5天可见伞状生长，肉汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。 该菌的生长范围为2--42℃（也有报道在0℃能缓慢生长），最适培养温度为35--37℃，在pH中性至弱碱性（pH9.6）、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好，在pH3.8－4.4能缓慢生长，在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。 一、生物学特性 2、培养特性 在固体培养基上，菌落初始很小，透明，边缘整齐，呈露滴状，但随着菌落的增大，变得不透明。 在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。 在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)琼脂上，用45°角入射光照射菌落，通过解剖镜垂直观察，菌落呈兰色、灰色或兰灰色。 血平板 血平板 血平板 一、生物学特性 3、生化反应 触酶阳性，氧化酶阴性。 能发酵多种糖类，产酸不产气，如发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖（迟发酵）、山梨醇、海藻糖、果糖。 不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖。 不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解。 吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性。 VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。 一、生物学特性 3、生化反应 过氧化氢酶，又称接触酶，能催 化过氧化氢水解为氢和氧 一、生物学特性 一、生物学特性 一、生物学特性 一、生物学特性 一、生物学特性 一、生物学特性 一、生物学特性 一、生物学特性 硝酸盐还原试验： 接种硝酸盐肉汤，35℃培养5天，加入 0.2ml的试剂A,再加入0.2ml的试剂B,轻 摇混合。呈粉红色、玫瑰红色、橙色、 棕色者表明有亚硝酸盐存在，为硝酸 盐还原阳性。 若无颜色变化，须加入少量锌粉 变红者为阴性（硝酸盐未被还原） 不变为阳性（亚硝酸盐已分解成氨和氮） 甲基红实验 V-P试验 一、生物学特性 4、血清型 根据菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原，将单增李氏菌分成13个血清型，分别是1/2a,1/2b,1/2c,3a,3c,3c,4a,4b;4ab,4c,4d,4e和“7”13个血清型。 致病菌株的血清型一般1/2b,1/2c,3a,3b,3c,4a,1/2a,4b,后两型居多。 一、生物学特性 该菌对理化因素的抵抗力较强，在土壤、粪便、青贮饲料和干草内能长期存活。 对碱和盐的抵抗力较强，60-70℃20-30min即被杀死；70%的酒精5min，2.5%的氢氧化钠、2.5%的石炭酸、2.5%的福尔马林20min即可杀死此菌。 该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。 二、流行病学 单增李氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在土壤、污水、地表水、废水、植物、青贮饲料、