生物活性材料促进关节软骨损伤修复和再生研究-干细胞和再生医学专业论文.docxVIP

浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘堂或其他教育机构的学位或 证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文 中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：了旺窜笈～ 签字日期： 乃／厂年多月z∥日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解滥鎏盘堂有权保留并向国家有关部门或机构 送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝婆盘堂可 以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者张弛被 锄始◇乙 签字日期： 伽／肄夕月zy日 签字日期：pl≮年 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 致谢 致 谢 衷心感谢我的导师欧阳宏伟教授。在这五年里，本人的博士课题，包括选题、 设计，执行以及课题相关论文的撰写、修改和定稿都得到了导师的精心指导。在 基础研究和转化研究方面，欧阳老师都给与了充分鼓励与支持，让我有信心面对 科研道路上的挑战。科研之外，欧阳老师“感恩、思考、理想”的人生准则使我 受益匪浅，对我今后的人生有十分积极向上的影响。回首过去五年，感到自己比 读博前二十二年进步、成长更多。 感谢纪俊峰教授、周以 教授对本课题的指导；感谢邹晓晖教授、柳华副教 授、章淑芳副教授、陈晓副教授、陆平讲师、陈佳林博士、姜洋子博士、赵洪石 博士对研究工作的支持；感谢陶佳栋、胡长长、陈隆坤、黄路、徐国伟、朱汀、 Boon Chin Heng等对实验过程的协助；感谢朱守安、吴岩、夏青青、刘婉璐、茵梓、 唐俏梅、胡嘉洁、刘欢欢、方芝、赵海燕、周婧、任浩、蔡友治等所有实验室成 员的帮助。 最后感谢我的父母和丈夫陈佳林在我求学生涯中给予的无私奉献与关爱! 感谢所有帮助过我、关心过我的人!愿幸福与快乐永远伴随你们! 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 中文摘要 生物活性材料促进关节软骨损伤修复和再生研究 浙江大学医学院 干细胞和再生医学 博士研究生： 张薇 导 师： 欧阳宏伟教授 中文摘要 肌肉骨骼和关节疾病影响着数千万人的健康。关节软骨是一种透明光滑的组 织，它覆盖在骨端关节头的表面，起到减少相邻两骨间的摩擦等作用。但它是一 种无血管无神经的组织，所以一旦缺损，很难自发修复。关节软骨损伤是临床上 十分常见的病症，也是骨科和运动医学中公认的治疗难题。由于软骨无血管无神 经，营养供应不佳，传统观点认为软骨损伤无法自发修复，如果不采取外加手段 干预治疗，会导致进一步的软骨磨损，甚至引发骨关节炎；另一方面，尽管骨软 骨损伤有一定的自发修复能力，但修复组织常出现软骨终末分化的现象，对其结 构和功能造成不可逆的损害，严重影响患者的生活工作质量。针对目前软骨损伤 修复过程中碰到的难题，本研究分别构建生物活性材料以开发针对性治疗方案。 首先通过对新西兰大白兔体内造模，我们评估了部分软骨损伤、全层软骨损 伤和骨软骨损伤的自发修复能力。结果显示部分软骨损伤无自发修复能力；全层 软骨损伤有一定自发修复能力，且观察到间质干细胞(MSCs)从缺损边缘向缺损 中心流动；骨软骨损伤有一定自发修复能力，但修复组织出现软骨终末分化现象。 进而针对部分软骨损伤修复，通过使用软骨损伤离体模型和生物材料模拟体 内微环境，评估了MSCs在部分和全层软骨损伤表面的粘附性和细胞形态，并进 一步利用Transwell实验评估外源性与内源性SDF．1对体外培养细胞的诱导迁移 作用。离体模型与体外实验结果显示，与软骨微环境和二型胶原(col II)支架相 比，软骨下骨微环境和一型胶原(col I)支架更有利于MSCs粘附，且SDF．1能 够显著提高MSCs的迁移。在此基础上构建的col I复合SDF．1生物活性支架为部 分软骨缺损创造了合适的微环境，动物实验验证显著提高了兔部分软骨损伤自发 II 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 中文摘要 修复能力。 最后针对骨软骨损伤修复，体外实验结果显示通过抑制经典W州D．catenin通 路活性，PTHrP能够显著降低茜素红染色和终末分化相关基因的表达。对新西 兰大白兔体内骨软骨损伤造模，缺损处移植胶原．蚕丝双层支架，并在三个不同时 间点关节腔注射PTHrP(术后4-6，7-9和10．12周)。术后4-6周PTHrP治疗组 的修复再生效果(软骨和软骨下骨的重建)要优于其他