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淋病奈瑟菌耐药性与毒力岛的研究临床检验诊断学专业论文
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学位论文独创性声明本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文中特别加以
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淋病奈瑟菌耐药性与毒力岛的研究中文摘要
淋病奈瑟菌耐药性与毒力岛的研究
中文摘要
【目的】
了解湛江和广州两地区淋病奈瑟菌的耐药现状和耐药水平;对淋病奈瑟菌的 毒力岛(PAIs)进行定位分析,阐明淋病奈瑟菌PAls在质粒及染色体上的分布情 况;初步探讨PAls与临床上常用抗生素耐药性的关系,明确携带有PAIs的菌株 的耐药水平,为淋病的治疗策略提供参考。
【方法】
1 对临床标本中分离的63株淋病奈瑟菌进行系统鉴定。
2 对淋病奈瑟菌进行抗生素敏感性试验:采用纸片扩散法(K.B法)测定63株 淋病奈瑟菌对19种抗生素的敏感性;采用琼脂稀释法测定47株淋病奈瑟茵 对5种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。
3 采用碘量法检测淋病奈瑟菌B.内酰胺酶。
4 采用碱裂解法提取淋病奈瑟菌的质粒,分析其质粒谱。
5 采用碱裂解法提取淋病奈瑟菌的质粒及染色体DNA,PCR扩增各PAls基因 (atlA、traG、trail),对其进行定位分析。
【结果】
l 63株淋病奈瑟菌除1株分离自尿液之外,其余62株均分离自泌尿生殖道分 泌物。感染者均为成年人,其中男性60例,女性3例。
2 K—B法测定63株淋病奈瑟菌对19种抗生素的敏感性,结果显示:对洛美沙 星、四环素、环丙沙星、氧氟沙星、青霉素的耐药情况十分严重,耐药率分 别为88.89%、87.30%、85.71%、74.60%、73.02%。对阿奇霉素、氨曲南、 壮观霉素、头孢噻肟、头孢曲松敏感性较高,敏感率分别为98.41%、98.41%、 96.83%、95.24%、88.89%。对5种以上抗生素耐药的临床株共54株,占
85.
85.71%o
3 琼脂稀释法测定47株淋病奈瑟菌对5种抗生素的敏感性,结果显示:对四 环素和环丙沙星的耐药状况非常严重,耐药率均为97.87%。对壮观霉素和 头孢曲松较为敏感,敏感率分别为91.49%和89.36%。
4 采用琼脂稀释法与K.B法测定47株淋病奈瑟菌对5种抗生素的耐药性,两 种方法的测定结果,差别均无统计学意义(P0.05)。
5 63株淋病奈瑟菌共检出产p.内酰胺酶的菌株即PPNG菌株21株,阳性率为
33.33%。B.内酰胺酶阳性菌株对青霉素和氨苄西林的耐药率高于阴性菌株, 其耐药率的差别有统计学意义(P0.05),对其它抗生素耐药率的差别无统计 学意义(PO.05)。
6 检测广州、湛江两地区淋病奈瑟菌对19种抗生素的敏感性,其中对青霉素、 四环素、壮观霉素、氨苄西林、氧氟沙星和氯霉素的耐药率差别有统计学意
义(PO.05),对其它抗生素的耐药率差别均无统计学意义(PO.05)。
7 63株淋病奈瑟菌的质粒总检出率为88.89%(56/63),共检出4.2kb、7.4kb、
39.5kb、42.5kb四种质粒,各种质粒检出率分别为33.33%(21/63)、
53.97%(34/63)、38.10%(24/63)、7.94%(5/63)。根据63株淋病奈瑟菌的质粒 检出情况,分为9种质粒谱型。以单一7.4kb、7.4kb+39.5 kb和单一4.2kb 最为多见,分别占30.16%、20.63%和17.46%。
8 以63株淋病奈瑟菌的染色体DNA为模板进行PCR扩增,atlA、traG和trail 的阳性检出率分别为74.60%(47/63)、34.92%(22/63)和68.25%(43/63)。以质 粒DNA为模板进行PCR扩增,atlA、traG和trail的阳性检出率分别为
74.60%(47/63),63.49%(40/63)和63.49%(40/63)。
9 将B一内酰胺酶阳性菌株与阴性菌株的毒力岛基因携带率进行比较,发现B. 内酰胺酶阳性菌株的染色体trail的
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