errγ在肾透明细胞癌中的表达及其功能学研究外科学泌尿外科专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 解放军医学院硕士学位论文ERR7在肾透明细胞癌中的表达及其功能学研究 解放军医学院硕士学位论文 ERR7在肾透明细胞癌中的表达及其功能学研究 中文摘要 目的：大量相关文献研究证实细胞核受体家族在多种肿瘤的发生发展过程中发挥 着重要作用，同时其表达水平的变化与肿瘤预后存在密切相关。根据前期芯片结 果提示，ERRy在不同分期的肾透明细胞癌中存在明显的差异化表达，而这一现象 在肾透明细胞癌中的可能的作用还未见相关文献报道。本实验旨在研究核受体家 族中ERRy受体在肾透明细胞癌肿瘤组织和瘤旁组织中的mRNA水平和蛋白水平 表达情况及其在肾透透明细胞中的增殖侵袭相关的生物学作用。 方法：选取56对肾透明细胞癌手术冰冻标本和相应癌旁正常肾实质组织，采用免 疫组化、Western blot法和实时定量PCR检测ERR33在肾透明细胞癌细胞株和离体 组织标本中蛋白和mRNA水平的表达情况，同时在体外培养的肾小管上皮HKC 细胞系、肾透明细胞癌细胞系786一O和769一P中检测相应表达。设计慢病毒过表 达质粒pLV-EGFP(2A)Puro．ESRRG和空载体对照组，构建肾透明细胞癌细胞系786一O 和769一P稳定高表达ERR),的细胞株，通过MTS法、流式细胞仪和划痕试验分别 检测细胞增值率、细胞周期和细胞横向迁移的变化。 结果：免疫组化和westernblot的检测结果表明与癌旁正常肾实质组织相比，ERR33 蛋白的表达水平在肾透明细胞癌组织中明显降低，和肾小管上皮HKC细胞系相比， ERR33的表达水平在肾透明细胞癌细胞系786一O和769一P中均降低0值均O．05)： 同时在临床病理中ERR33的mRNA水平与肾透明细胞癌病理的Fuhrman核分级呈 显著负相关(p0．05)，而且女性肾癌患者组织中的ERR33mRNA表达要显著高于 男性患者(p0．05)。在786一O和769．P细胞系的功能实验中，稳定高表达ERR), 的细胞株与空载体转染组的细胞株相对照比较，MTS法显示前者的增值率明显降 低，流式细胞仪检测显示高袁达ERR33的细胞株S期细胞比例明显降低并有G0／G1 细胞比例明显增加，划痕试验显示高表达ERR),后的细胞系其横向迁移生长速率明 显减慢。 结论：ERR33在肾透明细胞癌中的表达显著降低，其表达水平与病理Fuhrman核分 级之间存在显著相关性，且明显受患者性别影响。肾透明细胞癌的肿瘤发生发展 中ERR33可能发挥了抑制肿瘤生长的作用。 【关键词】雌激素相关受体：肾透明细胞癌：表达；增殖：迁移 解放军医学院硕士学位论文 2 解放军医学院硕士学位论文The 解放军医学院硕士学位论文 The Expression and Functional Study of ERR7 in Clear Cell Iknal Cell Carcinoma Abstract obJectgve：_Although multiple studies have shown tbat nuclear recept‘xs play蛐 im弭Ⅺ嚏日哪t role in’-arious human maI遮nancies．with the guidanoe of 0131former t∞icroarray of clear cell renal cell carcinoma(cc正㈣，a slIKly w鹞carried out to detect the expression of E】脚；which has not been investigated in clear cell renal cell carcinoma(ccRCC)．This study aLso aims to get step further to inves*_igate the biolosical function of ERRy,曩tran∞ription factor of the nuclear receptor farmily and its biological rotes in the tumorig汹of a=RCC． Materials and Method麓The expre稻ion of E RRy in m_RNA and protein levels were detected in htmaan kidney tubule e#thelial cell line(I-IKC)，786-0∞Roc celt line，and 769-P ecRCC cell line,as well鹋in 56 ca曩鹳of ccRCC surgicat specimens and their corresponding adja硼at